人端粒酶反转录酶反义寡核苷酸对胰腺癌细胞吉西他滨敏感性的影响

目的 通过体外实验探讨人端粒酶反转录酶(hTERT)反义寡核苷酸(ASODN)能否增强胰腺癌细胞对吉西他滨(健择)的敏感性.方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测hTERT mRNA表达情况;端粒重复序列扩增法(TRAP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法检测端粒酶活性;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)双染色法检测早期凋亡.结果 瞬时转染hTERT ASODN呈浓度依赖性下调细胞hTERT mRNA表达.0.2 μmol/L hTERT ASODN可显著下调端粒酶活性至0.47.健择在ASODN转染组中的IC50值为(0.8±0.2)μmol/L,而其在单纯脂质体转染对照组中为(7.3±0.9)μmol/L,差异具有统计学意义.ASODN可显著增加健择对肿瘤细胞的凋亡诱导作用,健择诱导的早期凋亡率在ASODN转染组中为60.28%,而其在脂质体对照组中为17.34%.结论 hTERTASODN可增强胰腺癌细胞对健择的敏感性,其机制可能与hTERT mRNA和端粒酶活性下调相关.