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| 棒曲霉孢子发育相关基因flbA的克隆和缺失突变株的鉴定 | |
| 摘 要： | 在模式真菌构巢曲霉中,FlbA蛋白位于分生孢子中心调控途径上游,对分生孢子的形成起激活作用.研究以1株实验室筛选的高产洛伐他汀棒曲霉Ac-32专利菌株的基因组为模板,克隆分生孢子发育相关基因flbA,用双接头PCR法构建flbA基因敲除盒,用根癌农杆菌介导转化法构建棒曲霉转化子库,依据转化子表型特征和分子特征鉴定flbA基因缺失突变株.结果表明:flbA基因全长为2 208 bp,翻译对应的氨基酸为734个,理论分子量和等电点分别为78 798.75 Da和8.64;棒曲霉与构巢曲霉flbA基因序列同源性为69.9%,氨基酸序列的同源性为76.6%;构建了flbA基因敲除盒和敲除载体,获得了258株棒曲霉转化子,经鉴定得到了1株flbA基因缺失突变株.研究成果为后续探讨棒曲霉flbA基因功能提供了材料,并奠定了理论基础. |
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