THE ESTABLISHMENT OF pS189/FLCⅢ 2 SYSTEM FOR MUTAGENESIS STUDY

本文报道优选基于ＳＶ４０的短暂复制型穿梭质粒ｐＳ１８９和新生儿羊膜上皮细胞ＦＬＣⅢ—２亚克隆，组成穿梭质粒／哺乳动物细胞诱变检测系统。该系统中ＳｕｐＦ的自发突变型频率仅为１．７×１０－５，低于已报道的其它短暂复制型质粒和该质粒在其它细胞中复制时ＳｕｐＦ基因的自发突变率。各种剂量的ＭＮＮＧ的诱发突变频率随诱变剂剂量的增加而升高。ＭＮＮＧ对ＦＬ细胞毒性较大，仅０．３２μｇ／ｍｌ就可使ＦＬ几乎完全失去生长分裂形成克隆的能力，但在短时期内对依赖于病毒复制起点的ＤＮＡ复制效率影响不大，突变频率却显著升高。突变质粒的限制性内切酶分析和靶基因的ＰＣＲ分析等表明，检出突变大多数为点突变或微小缺失，该系统具有方便快速检出点突变的能力，可成为检测诱变剂、抗诱变剂作用强度和特性的分子检测系统。