| MXR1基因对毕赤酵母工程茵代谢调控的影响 |
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| 引用本文： | 袁围,叶燕锐,林影.MXR1基因对毕赤酵母工程茵代谢调控的影响[J].生物技术通报,2011,0(8). |
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| 作者姓名： | 袁围 叶燕锐 林影 |
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| 作者单位： | 华南理工大学生物科学与工程学院,广州,510000 |
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| 摘 要： | 为了研究毕赤酵母中转录因子Mxrlp在毕赤酵母代谢调控中所起的作用,构建一株以南极假丝酵母脂肪酶B基因(CALB)作为报告基因,MXR1基因完全缺失的毕赤酵母基因工程菌株.将重组质粒pPIC9K-CALB转化毕赤酵母GS115,利用三丁酸甘油酯平板筛选得到分泌表达CALB的重组茵GS115/pPIC9K-CALB.通过重叠延伸PCR方法获得一段中间含有博来霉素抗性基因sh ble,两翼大约各有1 200 bp与毕赤酵母MXR1基因上下游同源的基因片段,将此片段用氯化锂法转化毕赤酵母细胞GS1 15/pPIC9 K-CALB后,利用博来霉素抗性及CALB酶活力丧失双重筛选的方法得到一株MXR1基因完全缺失的毕赤酵母基因工程菌株.该菌株在以甲醇为唯一碳源的培养基中不生长,在以乙醇、葡萄糖或者甘油为唯一碳源的培养基中生长缓慢.结果表明转录Mxrlp因子在毕赤酵母中的多条代谢途径中起着关键性的作用,主要涉及甲醇、乙醇、甘油和葡萄糖等代谢途径.
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| 关 键 词： | 毕赤酵母 代谢调控 基因敲除 转录因子 Mxr1p 南极假丝酵母 脂肪酶B |
The Effect of MXR1 Gene on Metabolic Regulation in Pichia pastoris |
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| Yuan Wei,Ye Yanrui,Lin Ying.The Effect of MXR1 Gene on Metabolic Regulation in Pichia pastoris[J].Biotechnology Bulletin,2011,0(8). |
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| Authors: | Yuan Wei Ye Yanrui Lin Ying |
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