大黄素对家兔离体主动脉平滑肌细胞增殖影响的可能途径

目的：探讨大黄素干预对家兔离体血管平滑肌细胞增殖的作用，并观察其浓度效应剂量。方法：实验于2004—06／12在第三军医大学西南医院药学部完成。选择雄性家兔1只作为动脉平滑肌细胞的动物来源，采用组织贴块法进行主动脉平滑肌细胞的培养。细胞培养成功后分2组：对照组和大黄素组。对照组不加药，大黄素组按剂量分为5个亚组即1．25，2、5，5，10，20mg／L组，每组6孔。选用生长良好的第三四代细胞，加^3H-标记的胸腺脱氧核苷酸行液闪计数以表征细胞增殖的程度，细胞增殖测定采用酶标仪上比色（波长为570nm）用吸光度值表示。超过氧化物歧化酶测定采用邻苯三酚自氧化抑制法，直接以每毫升培养液中超过氧化物歧化酶kat表示。脂质过氧化物测定采用改良TBA微量法，以脂质过氧化物的稳定终产物丙二醛浓度（nmol／L）表示。实验结果采用单因素方差分析（方差齐性检验），用SNK法进行均数之间的显著性检验。结果：①大黄素对细胞增殖的影响：随着大黄素剂量的增加，吸光度值逐渐减少，抑制率逐渐增高。大黄素5，10，20mg／L剂量组的吸光度值明显低于对照组（0．594&;#177;0．037，0．410&;#177;0．014，0．301&;#177;0．024，0．730&;#177;0.041，P〈0.05）。②大黄素对胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺人量的影响：随着大黄素剂量的增加，胸腺嘧啶脱氧核苷酸掺人量逐渐减少，抑制率逐渐增高。大黄素5，10，20mg／L剂量组每分液闪计数值明显低于对照组大黄素（33537&;#177;3713．29304&;#177;4336，21155&;#177;1938，73958&;#177;2276，t=5．862，7．330．18．688，P〈0．05）。③大黄素对超过氧化物歧化酶的影响：大黄素剂量1．25，2．5mg／L剂量组，超过氧化物歧化酶高于对照组，但差异不显著（P〉0．05）。5，10，20mg／L剂量组明显高于对照组（118．19&;#177;3．56），（127．48&;#177;4．59）．（140．23&;#177;4．96），（100．16&;#177;9．83）kat／L，t=4．224．6．170．8．914，P〈0．051。④对丙二醛含量变化的影响：随着大黄素剂量的增加，其水平逐渐减少，当大黄素剂量为5，10，20mg／L时与对照组相比显著减低（2．336&;#177;0．113），（1．945&;#177;0．135），（1．381&;#177;0．193），（3．110&;#177;0．256）nmol／L，t=6．774，9．857，13．187．P〈0．051。结论：随着培养液中大黄素浓度的增加，超过氧化物歧化酶活性逐渐增强，同时丙二醛水平逐渐降低，从而抑制血管平滑肌细胞的增殖此，此作用均从5mg／L剂量组开始，并具有浓度依赖性。

Possible way of emodin influencing the proliferation of rabbit aortic smooth muscle cells ex vivo