| 基于双荧光系统的HepG2肝细胞癌原位移植裸鼠模型建立及活体荧光成像动态定量分析 |
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| 引用本文： | 张飞翔,赵珂,高瑞,高慧英,詹轶群,李长燕,杨晓明.基于双荧光系统的HepG2肝细胞癌原位移植裸鼠模型建立及活体荧光成像动态定量分析[J].生物技术通讯,2019(2):228-234,274. |
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| 作者姓名： | 张飞翔 赵珂 高瑞 高慧英 詹轶群 李长燕 杨晓明 |
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| 作者单位： | 广东药科大学;军事医学研究院辐射医学研究所;军事医学研究院生命组学研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81273543);国家重点基础研究发展计划(2014CBA02001) |
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| 摘 要： | 目的:建立一种可以实时、定量、动态监测的肝细胞癌原位移植模型,并利用活体荧光成像系统对裸鼠体内原位肝细胞癌生长进行分析。方法:利用慢病毒包装系统包装pCDH-GFP-Luc质粒,将绿色荧光蛋白(GFP)和萤光素酶(Luc)基因通过病毒感染的方式整合到HepG2肝癌细胞染色体中,利用流式细胞术分选GFP+细胞,扩增培养后,将该细胞注射到裸鼠皮下进行成瘤,成瘤后分离肿瘤组织接种裸鼠肝脏,将造模成功的裸鼠分为对照组和治疗组,分别灌胃给与0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)和50 mg/kg索拉非尼,2/d,连续28 d,每7 d利用活体荧光成像系统观察肝癌细胞在对照组和治疗组裸鼠肝脏内的生长情况。实验结束后,分离裸鼠肝脏肿瘤,拍照称重。结果:建立了稳定表达双荧光的人肝癌细胞系HepG2-GFP-Luc,体外发光强度与表达萤光素酶的细胞数量呈正相关(R2=0.9945);建立了肝细胞癌原位移植活体荧光成像模型,对照组和治疗组肝脏内肿瘤细胞荧光强度随时间的延长逐渐增加,治疗组荧光强度明显低于对照组。定量分析结果显示,在第24、31和38 d,治疗组荧光总光子数值显著低于对照组;治疗组平均瘤重显著低于对照组。结论:建立了一种肝细胞癌原位移植荧光成像模型,可通过活体成像系统对肿瘤大小进行动态定量分析,为抗肝癌药物的药效学评价提供了实时定量分析动物模型。
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| 关 键 词： | 肝细胞癌 HEPG2细胞 活体荧光成像 萤光素酶 绿色荧光蛋白 定量分析 |
Establishment of a Nude Mouse Model of Orthotopic Transplantation of HepG2 Expressing Dual Fluorescence and Dynamic Quantitative Analysis of in Vivo Bioluminescent Imaging |
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| ZHANG Fei-Xiang,ZHAO Ke,GAO Rui,GAO Hui-Ying,ZHAN Yi-Qun,LI Chang-Yan,YANG Xiao-Ming.Establishment of a Nude Mouse Model of Orthotopic Transplantation of HepG2 Expressing Dual Fluorescence and Dynamic Quantitative Analysis of in Vivo Bioluminescent Imaging[J].Letters in Biotechnology,2019(2):228-234,274. |
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| Authors: | ZHANG Fei-Xiang ZHAO Ke GAO Rui GAO Hui-Ying ZHAN Yi-Qun LI Chang-Yan YANG Xiao-Ming |
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| Affiliation: | (Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China;Institute of Radiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China;Institute of Lifeomics,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 102206,China) |
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| Abstract: | ZHANG Fei-Xiang;ZHAO Ke;GAO Rui;GAO Hui-Ying;ZHAN Yi-Qun;LI Chang-Yan;YANG Xiao-Ming(Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China;Institute of Radiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China;Institute of Lifeomics,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 102206,China) |
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| Keywords: | hepatocellular carcinoma HepG2 cells in vivo bioluminescent imaging luciferase green fluorescent protein quantitative analysis |
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