| 绵羊胎盘生长因子基因可变剪切 异构体克隆与表达分析 |
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| 引用本文： | 张立春,李梦姝,柳俭强,云巾宴,曹阳,朴庆林,金海国. 绵羊胎盘生长因子基因可变剪切 异构体克隆与表达分析[J]. 聊城大学学报(自然科学版), 2019, 32(6): 90-96 |
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| 作者姓名： | 张立春 李梦姝 柳俭强 云巾宴 曹阳 朴庆林 金海国 |
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| 作者单位： | 吉林省农业科学院畜牧分院 ,吉林公主岭,136100;吉林省农业科学院畜牧分院 ,吉林公主岭136100;黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院 ,黑龙江齐齐哈尔161005;吉林农业科技学院动物科技学院 ,吉林左家,132101 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划（863计划）;吉林省人才开发资金资助 |
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| 摘 要： | 为克隆绵羊胎盘生长因子(Placental growth factor,PGF)基因,并分析该基因在绵羊组织器官中的表达模式,本研究首先利用RT-PCR(Reverse Transcript Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)方法从小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤组织克隆出PGF基因mRNA片段,随后利用可变剪切(alternative splicing,AS)鉴别引物和qRT-PCR(Quantity reverse transcript polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法对不同组织器官PGF基因AS及其表达模式进行分析.以两个品种绵羊皮肤组织cDNA为模板,RT-PCR扩增显示存在2条特异性扩增片段,克隆测序结果发现片段长度依次为1339bp和1276bp,分析发现1276bp片段是由于主转录本第7外显子缺失产生,为编码羧基末端缺失21个氨基酸的PGF蛋白突变体.该突变体并未引起血小板源生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)结构域改变,可能通过改变PDGF结构域下游单位酶切位点来影响PGF分子的成熟.PGF基因AS检测及qRT-PCR结果发现小尾寒羊与新吉细毛羊不同组织器官PGF基因可变剪切突变体组织分布及其表达模式存在明显差异.本研究证明绵羊皮肤组织中表达PGF基因且存在AS现象,为进一步研究PGF基因在绵羊毛囊发育及毛用性状形成中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 胎盘生长因子基因 新吉细毛羊 小尾寒羊 基因表达 可变剪切 |
The Cloningand Expression Pattern Analysis of Alternative SplicingIsoforms of Placental Growth Factor Gene from Sheep |
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