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miR-200c-3p靶向XIAP调控缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡
引用本文:厉广洲,徐继蕊,张丽丽.miR-200c-3p靶向XIAP调控缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡[J].中国动脉硬化杂志,2020,28(7):572-577.
作者姓名:厉广洲  徐继蕊  张丽丽
作者单位:日照心脏病医院心血管内科, 山东省日照市 276800;枣庄矿业集团枣庄医院心血管内科, 山东省枣庄市 277100
摘    要:目的探讨miR-200c-3p对缺氧复氧心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法构建缺氧复氧(H/R)H9c2细胞。运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-200c-3p、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)信使核糖核酸(mRNA)的表达。将H9c2细胞分为H/R+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、H/R+anti-miR-200c-3p组(转染anti-miR-200c-3p)、H/R+pcDNA组(转染pcDNA)、H/R+pcDNA-XIAP组(转染pcDNA-XIAP)、H/R+anti-miR-200c-3p+si-NC组(共转染anti-miR-200c-3p和si-NC)、H/R+anti-miR-200c-3p+si-XIAP组(共转染anti-miR-200c-3p和si-XIAP),用脂质体法转染至H9c2细胞,再进行缺氧复氧处理。免疫印迹(Western blot)、噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测细胞中XIAP、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病2 X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)的表达、细胞增殖、细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-200c-3p与XIAP的结合力。结果成功构建缺氧复氧H9c2细胞;与正常培养的H9c2细胞比较,H/R组H9c2细胞中miR-200c-3p表达明显上调,XIAP表达明显下调;抑制miR-200c-3p、过表达XIAP均可抑制H/R H9c2细胞的凋亡,下调cleaved Caspase-3、Bax,上调Bcl-2;miR-200c-3p可显著抑制XIAP 3′UTR野生型报告基因活性,并负向调控XIAP的表达;敲减XIAP可逆转抑制miR-200c-3p对H/R H9c2细胞的凋亡抑制作用。结论 miR-200c-3p可诱导缺氧复氧心肌细胞的凋亡,其机制与靶向XIAP有关,可为心血管疾病的治疗提供新靶点。

关 键 词:miR-200c-3p  XIAP  心肌细胞  凋亡  缺氧复氧
收稿时间:2019/11/21 0:00:00
修稿时间:2020/1/3 0:00:00

miR-200c-3p regulating the injury of hypoxia/reoxygenation myocardial cell by targeting XIAP
LI Guangzhou,XU Jirui,ZHANG Lili.miR-200c-3p regulating the injury of hypoxia/reoxygenation myocardial cell by targeting XIAP[J].Chinese Journal of Arteriosclerosis,2020,28(7):572-577.
Authors:LI Guangzhou  XU Jirui  ZHANG Lili
Affiliation:Department of Cardiovascular Medicine, Rizhao Cardiology Hospital, Rizhao, Shandong 277100, China;Department of Cardiovascular Medicine, Zaozhuang Hospital of Zaozhuang Mining Group, Zaozhuang, Shandong 277100, China
Abstract:
Keywords:miR-200c-3p  XIAP  cardiomyocytes  apoptosis  hypoxia/reoxygenation
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