| 脂质体介导血管内皮生长因子基因片段在犬骨髓基质干细胞中的表达及其影响 |
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| 引用本文： | 黄启顺,李明静,郑怀远,韩阿起,翁雨雄,陈振兵.脂质体介导血管内皮生长因子基因片段在犬骨髓基质干细胞中的表达及其影响[J].中华手外科杂志,2012,28(3). |
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| 作者姓名： | 黄启顺 李明静 郑怀远 韩阿起 翁雨雄 陈振兵 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院手外科,40022武汉 |
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| 基金项目： | 湖北省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨脂质体介导的重组血管内皮生长因子165(vascularendothelial growthfactor 165,VEGF165)基因转染后的犬骨髓基质干细胞分泌血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)的能力及细胞增殖能力的改变,为改善骨缺血坏死的干细胞治疗方法提供基础.方法 实验分VEGF165基因转染组与空白对照组,从成年犬的胫骨抽取骨髓,体外分离纯化,贴壁培养骨髓基质干细胞,传代培养后以脂质体法将携带荧光蛋白VEGF165基因的穿梭质粒转入实验组骨髓基质干细胞中,在荧光显微镜视下观察转染效率,并通过ELISA法分别检测转染后1、3、5、7、9、11、13 d实验组与对照组培养液中VEGF的含量,对结果进行统计分析.MTT法检测转染细胞的增殖能力,绘制增殖曲线.结果 重组人血管内皮生长因子165(recombinate the human being vasular endotheial growth factor165,hVEGF165)基因通过脂质体能够成功转染犬骨髓基质干细胞并分泌VEGF.h-VEGF165基因转染组培养液中VEGF蛋白含有量较未转染组增高,ELISA结果显示转染后上清液中第2天即可出现VEGF浓度的增高,到第7天时达到分泌高峰,筛选后的细胞上清液中VEGF浓度稳定在300ng/L左右,与对照组相比升高约10倍,其差别具有显著的统计学意义.骨髓基质干细胞转染基因后,细胞的增殖能力同对照组相比无明显差别.结论 采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到犬骨髓间充质干细胞中并可有效表达VEGF. hVEGF165基因转染犬骨髓基质干细胞对细胞的增殖能力无明显影响.
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 骨髓基质干细胞 脂质体 质粒 重组血管内皮生长因子165 |
Expression of vascular endothelial growth factor gene mediated by lipofectamin in canine bone marrow |
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| HUANG Qi-shun
,
LI Ming-jing
,
ZHENG Huai-yuan
,
HAN A-chao
,
WENG Yu-xiong
,
CHEN Zhen-bing.Expression of vascular endothelial growth factor gene mediated by lipofectamin in canine bone marrow[J].Chinses Journal of Hand Surgery,2012,28(3). |
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| Authors: | HUANG Qi-shun LI Ming-jing ZHENG Huai-yuan HAN A-chao WENG Yu-xiong CHEN Zhen-bing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vascular endothelial growth factor Bone mesenchymal stem cells Lipofectamin Plasmids VEGF165 |
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