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小分子干扰RNA抑制293T细胞中外源基因OX40的表达
引用本文:夏仁品 卢实春 武聚山 李宁 陈永兵 朱俊萍 丁惠国. 小分子干扰RNA抑制293T细胞中外源基因OX40的表达[J]. 中国现代临床医学, 2007, 6(3): 3-6
作者姓名:夏仁品 卢实春 武聚山 李宁 陈永兵 朱俊萍 丁惠国
作者单位:[1]首都医科大学附属北京佑安医院肝胆外科,北京100069 [2]首都医科大学微生物及免疫学系,北京100069
基金项目:2005年留学人员科技活动择优资助基金资助项目,2004年北京市卫生局科研资助项目(2004-局-052)
摘    要:目的研究小分子干扰RNA(siRNA)抑制293T细胞中OX40基因表达的可行性。方法根据大鼠OX40 cDNA已知序列,设计并化学合成一条含19个核苷酸siRNA。将此siRNA包装入质粒载体后,转化质粒到大肠杆菌中,经克隆,扩增,纯化。应用Lipofectamine 2000将OX40基因表达载体与其相应siRNA(OX40-siRNA)质粒共转染293T细胞,观察siRNA载体对OX40基因的抑制效应。在转染后48h用实时定量PCR从基因转录水平检测OX40基因的表达率,并以western blot在蛋白水平检查293T细胞中OX40蛋白的表达水平。结果siRNA转染293T细胞28h后,OX40靶mRNA及OX40蛋白的表达水平明显下降;且siRNA所介导的抑制效应与干扰载体剂量大小有关。结论siRNA能抑制293T细胞中OX40基因表达,从而为siRNA作为一种可能的治疗手段提供了理论依据。

关 键 词:干扰RNA 基因沉默 OX40
文章编号:1726-8648(2007)03-0003-04
收稿时间:2007-01-19

Study on Gene Silence of OX40 Gene Triggered by Small Interfering RNA in 293T Cells
Xia Renpin, Lu Shichun,Wu Jushan,et al.. Study on Gene Silence of OX40 Gene Triggered by Small Interfering RNA in 293T Cells[J]. Chinese Journal of Clinical Medicine, 2007, 6(3): 3-6
Authors:Xia Renpin   Lu Shichun  Wu Jushan  et al.
Affiliation:Xia Renpin, Lu Shichun,Wu Jushan, et al.
Abstract:
Keywords:Small interfering RNA Gene silence OX40
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