小鼠双尾C蛋白Bicc1多克隆抗体的制备及细胞内定位的初步研究 |
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作者姓名: | 戴宝贞 周亮 付玉龙 丁镇伟 李煜 吴冠青 |
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作者单位: | 1. 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,内蒙古,呼和浩特,010021;中国医学科学院肿瘤医院,肿瘤研究所,,北京,100021 2. 中国医学科学院肿瘤医院,肿瘤研究所,北京,100021;中国科学院昆明动物研究所,云南,昆明,650000 3. 中国医学科学院肿瘤医院,肿瘤研究所,,北京,100021 4. 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,内蒙古,呼和浩特,010021 5. 中国医学科学院肿瘤医院,肿瘤研究所,北京,100021 |
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基金项目: | 长江学者计划支持项目,国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的:制备小鼠双尾C蛋白Bicc1的多克隆抗体并确定其在细胞内定位.方法:根据生物信息学分析结果, PCR扩增小鼠Bicc1编码61E-199A的cDNA片段.将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上, 在IPTG诱导下产生Bicc1-N抗原.纯化目的蛋白并制备兔抗Bicc1蛋白多克隆抗体.Western blot鉴定抗体特异性, 并以间接免疫荧光法初步分析该蛋白在细胞内定位.结果:成功构建Bicc1-N片段原核表达载体, 在大肠杆菌中实现可溶性表达, 制备小鼠Bicc1蛋白的多克隆抗体, 并证实该蛋白主要表达于细胞质内.结论:成功制备了高效价并特异的兔抗Bicc1多克隆抗体, 为进一步研究Bicc1基因产物的生物功能奠定了基础.
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关 键 词: | 小鼠双尾-C基因 多克隆抗体 多囊肾 |
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