绿色荧光蛋白α2b-干扰素融合蛋白的表达与活性研究 |
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引用本文: | 田旺,李正赫,杨文博,白钢.绿色荧光蛋白α2b-干扰素融合蛋白的表达与活性研究[J].南开大学学报,2005,38(5):26-30. |
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作者姓名: | 田旺 李正赫 杨文博 白钢 |
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作者单位: | 南开大学生命科学学院 天津300071 |
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摘 要: | 采用基因重组技术,构建原核表达质粒pET 32a( )/GFP-α2b-IFN,转化大肠杆菌BL 21,以IPTG诱导融合蛋白的表达并用镍金属螯合层析柱进行纯化.SDS-PAGE及免疫印迹结果显示,46.0 kD的融合蛋白在大肠杆菌中得到了正确的表达,并具有α2b-IFN的抗原活性.受体结合实验表明,该融合蛋白能够与W ISH细胞上的干扰素受体特异性结合,并在激发光下呈亮绿色荧光.采用细胞病变法测定分离纯化的融合蛋白的抗病毒活性,比活力为1.0×107IU/m g.表达的GFP-α2b-IFN融合蛋白具有α2b-IFN的特性与荧光活性,为研究α2b-IFN受体功能以及IFN与细胞相互作用的机理奠定了基础.
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关 键 词: | 绿色荧光蛋白 α2b-干扰素 融合蛋白 原核表达 |
文章编号: | 0465-7942(2005)05-0026-05 |
收稿时间: | 05 23 2005 12:00AM |
修稿时间: | 2005年5月23日 |
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