ImmunoAIF△1-480融合蛋白对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用 |
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作者姓名: | 韩涛 张勇 孙书明 任君琳 李伟 郭张燕 孟艳玲 杨安钢 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学免疫学教研室,陕西,西安,710032 2. 新乡医学院免疫学教研室,河南,新乡,453003 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划),教育部长江学者和创新团队发展计划 |
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摘 要: | 目的:观察免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用.方法:利用PCR的方法将九聚精氨酸编码序列(R9)与AIF C-末端结构域编码区重组, 然后将R9-AIF△1-480基因与pCMV-e23sFv载体重组, 构建免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480真核表达载体.用脂质体法转染CHO细胞, 经G418筛选, 建立稳定转染的细胞株, 通过RT-PCR、Western blot、流式细胞术(FCM)等方法检测重组基因在转染细胞中的表达及其对HER2阳性肿瘤细胞的特异性杀伤活性.结果:经过酶切鉴定与测序证实, 带有ImmunoAIF△1-480基因的真核表达载体构建成功, 经RT-PCR、Western blot可检测到培养上清中免疫促凋亡基因的表达, 用FCM检测发现融合蛋白ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞SGC-7901和SKBR-3有明显的促凋亡活性, 而对不表达HER2分子的ECV-304细胞几乎没有影响.结论:ImmunoAIF△1-480可以特异性杀伤HER2阳性肿瘤细胞.
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关 键 词: | 凋亡诱导因子 HER2阳性肿瘤细胞 细胞凋亡 |
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