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| 杜仲SSR-PCR反应体系的优化 | |
| 引用本文： | 糜亚男,张水寒,蔡媛,梁雪娟,蒋超. 杜仲SSR-PCR反应体系的优化[J]. 中国实验方剂学杂志, 2015, 21(2): 1-6 |
| 作者姓名： | 糜亚男 张水寒 蔡媛 梁雪娟 蒋超 |
| 作者单位： | 1. 湖南省中医药研究院 中药研究所,长沙 410013;湖南中医药大学,长沙 410208 2. 湖南省中医药研究院 中药研究所,长沙,410013 3. 中国中医科学院 中药研究所,北京,100700 |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目(2011BAI01B08) |
| 摘 要： | 目的:建立杜仲简单重复序列-聚合酶链式反应(SSR-PCR)的优化反应体系,为杜仲种质间的遗传差异及亲缘关系分析提供参考。方法:选择Taq DNA聚合酶,模板DNA,Mg2+,引物及d NTP浓度为考察因素,利用单因素试验和L16(45)正交试验优选杜仲的SSR-PCR反应体系,运用SPSS软件对试验结果进行分析。结果:各因素水平变化对反应体系影响顺序依次为Mg2+Taq DNA聚合酶引物d NTP模板DNA。优化的PCR反应体系为10×PCR缓冲液2μL,Taq DNA聚合酶0.5U,Mg2+浓度1.25 mmol·L-1,d NTP浓度0.2 mmol·L-1,引物浓度0.3μmol·L-1,模板DNA用量60 ng,定容至20μL。结论:利用该体系进行扩增,所得谱带明亮清晰,稳定性和重复性良好,适用于杜仲不同居群间亲缘关系和遗传多样性分析。 |
| 关 键 词： | 杜仲 微卫星标记 聚合酶链式反应 反应体系 引物 |
| 收稿时间： | 2014-07-31 |
Optimization of SSR-PCR Reaction System in Eucommiae Cortex |
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| MI Ya-nan,ZHANG Shui-han,CAI Yuan,LIANG Xue-juan and JIANG Chao. Optimization of SSR-PCR Reaction System in Eucommiae Cortex[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2015, 21(2): 1-6 | |
| Authors: | MI Ya-nan ZHANG Shui-han CAI Yuan LIANG Xue-juan JIANG Chao |
| Affiliation: | Institute of Chinese Materia Medica, Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha 410013, China;Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China;Institute of Chinese Materia Medica, Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha 410013, China;Institute of Chinese Materia Medica, Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha 410013, China;Institute of Chinese Materia Medica, Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha 410013, China;Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Eucommiae Cortex microsatellite markers polymerase chain reaction reaction system primer |
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