miR-543靶向TCF7L2调控BMSCs成脂分化的实验研究 |
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引用本文: | 封宝红,喻业安,晏莉,伍军,张艳霞,朱戈丽.miR-543靶向TCF7L2调控BMSCs成脂分化的实验研究[J].中国骨质疏松杂志,2022(12):1770-1776. |
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作者姓名: | 封宝红 喻业安 晏莉 伍军 张艳霞 朱戈丽 |
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作者单位: | 武汉市第三医院光谷院区肾内科,湖北 武汉 430014 |
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基金项目: | 武汉市医学科研项目(WX20B22) |
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摘 要: | 目的 探讨微小RNA-543(miR-543)靶向调控转录因子7类似物2(TCF7L2)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂分化的影响。方法 分离并鉴定大鼠BMSCs,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测BMSCs成脂分化诱导过程中miR-543的表达变化;体外培养BMSCs细胞,对BMSCs细胞进行干预,过表达miR-543、抑制TCF7L2表达或同时过表达miR-543与TCF7L2,使用成脂分化诱导培养基培养,油红O染色检测BMSCs成脂分化;免疫印迹法检测BMSCs细胞TCF7L2、脂肪细胞蛋白2(aP2)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-543与TCF7L2的靶向关系。结果 成功分离大鼠BMSCs;BMSCs成脂分化诱导处理1、2、3、4、5 d后miR-543表达水平降低;双荧光素酶报告基因实验证实miR-543与TCF7L2存在靶向关系;过表达miR-543或抑制TCF7L2表达,BMSCs油红O染色后OD值、aP2、PPAR-γ、C/EBPα蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达TCF7L2可部分逆转过表达miR-543对BMSCs细胞成脂分化的抑制作用(P<0.05)。结论 miR-543在大鼠BMSCs细胞成脂分化过程中下调表达,过表达miR-543可通过靶向抑制TCF7L2表达而抑制BMSCs细胞成脂分化。
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关 键 词: | 微小RNA-543 转录因子7类似物2 骨髓间充质干细胞 成脂分化 大鼠 |
Experimental study on miR-543 targeting TCF7L2 to regulate the adipogenic differentiation of BMSCs |
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