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中成药DNA提取技术优化及其在人参类制剂分子鉴定中的应用
引用本文:程春松,谭天琪,龙泽,刘智祖,吴文如,王英平,刘良,周华.中成药DNA提取技术优化及其在人参类制剂分子鉴定中的应用[J].中草药,2015,46(17):2549-2555.
作者姓名:程春松  谭天琪  龙泽  刘智祖  吴文如  王英平  刘良  周华
作者单位:澳门科技大学中医药学院, 澳门特别行政区 氹仔;中药质量研究国家重点实验室(澳门科技大学), 澳门特别行政区 氹仔;澳门科技大学中医药学院, 澳门特别行政区 氹仔;澳门科技大学中医药学院, 澳门特别行政区 氹仔;澳门科技大学中医药学院, 澳门特别行政区 氹仔;广州中医药大学中药学院, 广东 广州 510000;中国农业科学院特产研究所, 吉林 长春 132109;澳门科技大学中医药学院, 澳门特别行政区 氹仔;中药质量研究国家重点实验室(澳门科技大学), 澳门特别行政区 氹仔;澳门科技大学中医药学院, 澳门特别行政区 氹仔;中药质量研究国家重点实验室(澳门科技大学), 澳门特别行政区 氹仔
基金项目:澳门科学技术发展基金(071/2011/A3)
摘    要:目的 建立并完善从中成药及保健品中提取DNA的有效方法,并在人参类制剂中进行验证。方法 使用中成药和保健品中常用的辅料(如淀粉、蔗糖、葡萄糖等)模拟CTAB法提取DNA过程,用以筛选影响提取DNA效率的因素;使用甲醇作为沉淀试剂优化传统的CTAB法,并使用MAS-PCR方法对市场上人参类中成药及保健品进行分子鉴定,以验证优化的技术。结果 中成药及保健品中的淀粉(包括药源性淀粉和辅料添加的淀粉)通过CTAB反应后生成极性较大的复合物,其与70%乙醇不能互溶,而且在碱性条件下对DNA有强烈的溶解作用,从而影响了CTAB法提取DNA的提取效率;利用甲醇作为沉淀试剂能够有效去除CTAB裂解过程中产生的高极性复合物的影响,70%甲醇-醋酸钠溶液能够有效提取中成药及保健品的DNA;利用优化的DNA提取方法和MAS-PCR法实现了11种市售人参类制剂的快速分子鉴定,结果显示8种与商品描述一致、1种有掺伪情况、2种为伪品。结论 使用甲醇作为沉淀试剂优化传统的CTAB法,可以较好地克服中药制剂中淀粉对DNA提取的不利影响,可以有效地实现基于DNA的中药制剂分子鉴定。

关 键 词:中成药  DNA  分子鉴定  人参类制剂  CTAB法  淀粉  蔗糖  葡萄糖
收稿时间:2015/5/22 0:00:00

Optimization of DNA extraction for Chinese patent medicine and its application on molecular identification of ginseng preparations by MAS-PCR
CHENG Chun-song,TAN Tian-qi,LONG Ze,LIU Zhi-zu,WU Wen-ru,WANG Ying-ping,LIU Liang and ZHOU Hua.Optimization of DNA extraction for Chinese patent medicine and its application on molecular identification of ginseng preparations by MAS-PCR[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2015,46(17):2549-2555.
Authors:CHENG Chun-song  TAN Tian-qi  LONG Ze  LIU Zhi-zu  WU Wen-ru  WANG Ying-ping  LIU Liang and ZHOU Hua
Affiliation:Faculty of Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;Faculty of Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;Faculty of Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;Faculty of Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;College of Chinese Medicines, Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510000, China;Institute of Special Wild Economic Animal and Plant, Chinese Academy of Agriculture Science, Changchun 132109, China;Faculty of Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;Faculty of Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China;State Key Laboratory of Quality Research in Chinese Medicine, Macau University of Science and Technology, Taipa, Macau Special Administrative Region, China
Abstract:
Keywords:Chinese patent medicine  DNA  molecular identification  ginseng preparations  starch  sucrose  glucose
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