| 洋葱伯克霍尔德氏菌L68邻苯二酚2,3-双加氧酶基因克隆、表达和纯化 |
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| 引用本文： | 吕鹏,刘大桅,张长铠.洋葱伯克霍尔德氏菌L68邻苯二酚2,3-双加氧酶基因克隆、表达和纯化[J].食品与生物技术学报,2006,25(3):11-14. |
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| 作者姓名： | 吕鹏 刘大桅 张长铠 |
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| 作者单位： | 山东大学,微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100 |
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| 摘 要： | 采用自行设计的引物,从洋葱伯克霍尔德氏菌L68中PCR扩增得到phnE（邻苯二酚2,3-双加氧酶）基因,亚克隆到高表达载体pET 32a上,转入表达菌株中.经双向测序,证实构建过程中未出现突变.重组子经IPTG诱导后,可以表达有活性的重组双加氧酶.选择26 ℃进行重组蛋白诱导.薄层扫描显示,表达重组蛋白总量最高可占总蛋白的64.92%.利用金属螯合层析对重组蛋白进行了一步纯化,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白纯度达到95%.
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| 关 键 词： | 洋葱伯克霍尔德氏菌 邻苯二酚2 3-双加氧酶 克隆表达 金属螯合层析 |
| 文章编号： | 1673-1689(2006)03-0011-04 |
| 修稿时间： | 2005年12月23 |
Cloning, Expression and Purification of Catechol 2,3-Dioxygenase from Burkholderia cepacia L68 |
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| LUI Peng,LIU Dawei,ZHANG Chang-kai.Cloning, Expression and Purification of Catechol 2,3-Dioxygenase from Burkholderia cepacia L68[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2006,25(3):11-14. |
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| Authors: | LUI Peng LIU Dawei ZHANG Chang-kai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Burkholderia cepacia catechol 2 3-dioxygenase cloning expression purification |
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