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复性的乙型肝炎病毒X蛋白突变体HBxΔNΔC具有体外生物学活性
作者姓名:祁祺  李龙  孙凯雷  胡小健
作者单位:1. 复旦大学 生命科学学院 生理学与生物物理学系,上海200438;复旦大学 生殖与发育研究所,上海200032;2. 复旦大学 生命科学学院 生理学与生物物理学系,上海,200438;3. 复旦大学 生命科学学院 生理学与生物物理学系,上海200438;上海工业菌株工程技术研究中心,上海200438
基金项目:grants from Chinese High-tech Research and Development Program,Shanghai Science and Technology Commission,Shanghai Leading Academic Discipline Project,National Talent Training Fund in Basic Research of China
摘    要:乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)在肝炎引起的肝癌病变中作为一个多功能调节因子起着关键的作用.对HBx的功能有非常多的体外研究报导,而由于HBx蛋白难以溶解和稳定使得体外的研究报导非常少.我们根据肝癌患者中最常见的截短突变体,在大肠杆菌包涵体中重组表达了一个保留了第12~127位氨基酸的、N端和C端截断的突变体HBxΔNΔC,并使用变复性的方法将其复性溶解.分子筛显示HBxΔNΔC为单体;圆二色谱显示HBxΔNΔC包含有5%的α-螺旋,30%的β-折叠和65%的其他结构.复性的HBxΔNΔC能从人HepG2细胞中拉下(pull-down)肿瘤抑制因子p53和DDB1蛋白,它还能刺激肝细胞的迁移.腹腔注射1μg/g的HBxΔNΔC能明显刺激小鼠肝的生长.这些结果显示HBxΔNΔC具有一定的生物学活性,它可以用来研究体外的HBx结构和分子作用机制.

关 键 词:乙型肝炎病毒X蛋白  截短突变体  失活与复活  单体  体外的
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