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人血管内皮细胞生长因子重组腺病毒载体的构建、鉴定及在骨髓间充质干细胞的表达
引用本文:郜勇,杨述华,杨操,王瑞英,叶树楠. 人血管内皮细胞生长因子重组腺病毒载体的构建、鉴定及在骨髓间充质干细胞的表达[J]. 中华实验外科杂志, 2006, 23(2): 138-140
作者姓名:郜勇  杨述华  杨操  王瑞英  叶树楠
作者单位:430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30170945).
摘    要:目的构建人血管内皮细胞生长因子(VEGF)165腺病毒表达载体,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞研究其相关特性。方法利用细菌内同源重组技术快速构建Ad-VEGF165腺病毒重组质粒,经酶切及测序鉴定正确后转染人胚肾细胞HEK293包装成为重组Ad-VEGF165腺病毒,并进行电镜观察及滴度测定。感染大鼠骨髓间充质干细胞观察VEGF165基因的转录和表达。结果酶切鉴定及基因测序证实重组腺病毒质粒含有hVEGF165cDNA,电镜显示包装细胞中有大量病毒颗粒存在,测定包装的病毒滴度为6.3×1010TCID50/ml。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学及免疫印迹检测骨髓间充质干细胞内有VEGF165的转录和表达。结论构建的VEGF腺病毒表达载体可有效感染骨髓间充质干细胞,并在体外高效表达,为将表达VEGF基因的骨髓间充质干细胞用于基因治疗提供了实验依据。

关 键 词:血管内皮生长因子 腺病毒载体 骨髓 间充质干细胞 基因治疗
收稿时间:2005-06-06
修稿时间:2005-06-06

Construction of recombinant adenoviruse vector containing human vascular endothelial growth factor and its expression in mesenchymal stem cells
GAO Yong,YANG Shu-hua,YANG Cao,et al.. Construction of recombinant adenoviruse vector containing human vascular endothelial growth factor and its expression in mesenchymal stem cells[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2006, 23(2): 138-140
Authors:GAO Yong  YANG Shu-hua  YANG Cao  et al.
Affiliation:GAO Yong,YANG Shu-hua,YANG Cao,et al.Department of Orthopaedics,Union Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430022,China
Abstract:
Keywords:Vascular endothelial growth factor   Bone marrow   Mesenchymal stem cells   Adenovirus vector   Gene therapy
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