FBS对成骨生长肽促进BMSCs增殖分化的影响

目的探讨培养液中不同浓度FBS对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)促进BMSCs增殖和分化的影响。方法取8只5周龄SD大鼠四肢骨,贴壁法分离纯化BMSCs并传代,倒置相差显微镜下观察细胞形态。取第3代BMSCs分组培养:分别采用浓度为1×10-10、1×10-9和1×10-8 mol/L的OGP进行培养,以正常培养细胞作为对照组;同时每组设FBS浓度为0、2%、5%、8%和10%5个梯度。培养后1、3、5、7、9、12 d采用MTT法检测细胞增殖,9 d时采用对硝基苯磷酸二钠法测定早期分化指标细胞内ALP活性。结果倒置相差显微镜下观察BMSCs贴壁生长,增殖迅速,呈纤维状涡旋生长,形态典型。MTT检测示,FBS低于5%时各组细胞不能持续增殖,当FBS浓度为8%以上时细胞可持续增殖;OGP 1×10-8 mol/L和1×10-9 mol/L组在FBS各浓度中促增殖效果均大于对照组(P0.05);FBS浓度低于10%时,OGP 1×10-8 mol/L组促增殖效果显著优于其余OGP浓度组(P0.05),但FBS浓度为10%时OGP 1×10-8 mol/L组无促增殖优势。ALP检测示,各组组内随FBS浓度增加,ALP活性增加(P0.05);当FBS浓度为5%、8%时,各OGP浓度组ALP活性均大于对照组(P0.05),且OGP 1×10-8 mol/L组最高(P0.05);当FBS浓度为10%时,各OGP组ALP活性仍大于对照组(P0.05),但OGP1×10-8 mol/L组与OGP 1×10-9 mol/L组差异无统计学意义(P0.05)。结论 8%FBS浓度为OGP促进BMSCs增殖分化的最佳血清浓度,且OGP促进BMSCs增殖分化的最适浓度为1×10-8 mol/L。