| 法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建和初步鉴定 |
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| 引用本文： | 刘昀,孙秀珍,徐晶,吴媛媛,史红阳,方萍. 法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建和初步鉴定[J]. 山西医科大学学报, 2015, 0(4): 327-330 |
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| 作者姓名： | 刘昀 孙秀珍 徐晶 吴媛媛 史红阳 方萍 |
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| 作者单位： | 西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81102252);卫生部重点课题基金资助项目(2007353) |
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| 摘 要： | 目的构建法国梧桐花粉变应原c DNA表达文库并初步鉴定。方法利用Trizol法抽提法国梧桐花粉总RNA,经过Oligo(d T)纤维素柱纯化后分离mRNA,反转录合成ds c DNA,连接EcoRⅠ接头,末端磷酸化,XhoⅠ消化,电泳分离并凝胶回收大于500 bp以上的c DNA片段,与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌,构建c DNA文库,检测文库容量和重组率,并采用PCR方法对插入的c DNA片段大小进行分析。结果成功构建了一个文库容量为3.5×106pfu/ml,重组率为94%,平均插入片段长度约为0.7 kb的法国梧桐花粉变应原c DNA表达文库。结论所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的 c DNA,为进一步研究法国梧桐花粉主要变应原基因并制备重组标准化法国梧桐花粉主要变应原疫苗奠定基础。
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| 关 键 词： | 法国梧桐花粉 变应原 c DNA表达文库 |
Construction and primary identification of cDNA expression library of Platanus acerifolia pollen allergen |
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| LIU Yun;SUN Xiuzhen;XU Jing;WU Yuanyuan;SHI Hongyang;FANG Ping. Construction and primary identification of cDNA expression library of Platanus acerifolia pollen allergen[J]. Journal of Shanxi Medical University, 2015, 0(4): 327-330 |
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| Authors: | LIU Yun SUN Xiuzhen XU Jing WU Yuanyuan SHI Hongyang FANG Ping |
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| Affiliation: | LIU Yun;SUN Xiuzhen;XU Jing;WU Yuanyuan;SHI Hongyang;FANG Ping;Department of Respiration,Second Affiliated Hospital,Medical School of Xi’an Jiaotong University; |
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