| 反义B7-1质粒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 李蕊,米曰堂,杨玉秀,张颖慧.反义B7-1质粒载体的构建与鉴定[J].中华实验外科杂志,2012,29(8). |
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| 作者姓名： | 李蕊 米曰堂 杨玉秀 张颖慧 |
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| 作者单位： | 1. 252000,山东省聊城市人民医院普外科
2. 252000,山东省聊城市人民医院保健科 |
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| 摘 要： | 目的 构建反义B7-1质粒载体,为研究阻断B7-1/CD28共刺激分子通路提供基础.方法 设计含有Xho Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点的1对引物,通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增获取质粒载体pcDNA3-B7-1上的目的片段B7-1( 118～ 530 nt,426 bp),克隆入PMD18-T中间载体.PMD18-T-B7-1经Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,B7-1片段与pcDNA3B(-)连接,pcDNA3B(-)的Xho Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点与B7-1全基因序列所含酶切位点相反,构建反义B7-1表达载体.结果 反义基因重组体经过酶切和PCR检测,得到426 bp左右的目的基因片段.测序证明插入的目的片段碱基序列与Genebank报道的B7-1基因序列(G1:111038144)中的B7-1片段100％同源,且反方向插入载体.结论 成功构建大鼠B7-1反义真核表达载体,为阻断B7-1/CD28共刺激通路抑制排斥反应奠定了基础.
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| 关 键 词： | 共刺激分子B7-1 反义寡核苷酸类 真核表达载体 |
Construction and identification of eukaryotic expression vector of antisense B7-1 |
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| LI Rui
,
MI Yue-tang
,
YANG Yu-xiu
,
ZHANG Ying-hui.Construction and identification of eukaryotic expression vector of antisense B7-1[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2012,29(8). |
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| Authors: | LI Rui MI Yue-tang YANG Yu-xiu ZHANG Ying-hui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Costimulatory molecule B7-1 Antisense oligonucleotides Eukaryotic expression vector |
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