| 培养猫角膜内皮细胞的新方法——联合酶消化法 |
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| 引用本文： | 陆雯娟,傅瑶,邵春益,范先群.培养猫角膜内皮细胞的新方法——联合酶消化法[J].眼科新进展,2008,28(2):81-84. |
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| 作者姓名： | 陆雯娟 傅瑶 邵春益 范先群 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科,上海市,200011 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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上海市教委资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 寻找一种可以快速获得大量猫原代角膜内皮细胞的方法.方法 揭取猫角膜后弹力层,反复剪碎,用2 g·L-1复合胶原酶消化40 min,再用2.5 g·L-1胰蛋白酶-EDTA消化2 min,离心、细胞计数后以50×106 L-1的浓度接种.待细胞长满皿底后传代,接种浓度同原代培养.记录细胞的形态以及原代细胞的数目、原代细胞铺满皿底的时间、细胞传代时间和传代次数,并与组织块贴壁法和揭膜消化法相比较.结果 联合酶消化法获得的原代细胞可以形成典型的铺路石样结构,无基质细胞污染,每片角膜可以收获(100～200)×103个细胞,只需5 d就可以首次传代,传代后4 d即可达到80%融合,连续传代8次仍可以维持小多边形的形态.结论 胶原酶和胰蛋白酶联合消化法可以快速获得大量的猫角膜内皮细胞.
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| 关 键 词： | 猫 角膜 内皮细胞 培养 养猫 角膜内皮细胞 方法 酶消化法 method Novel in vitro 酶联 蛋白 胶原酶 多边形 连续传代 融合 污染 基质细胞 结构 铺路石 结果 比较 揭膜 |
| 文章编号： | 1003-5141（2008）02-0081-04 |
| 收稿时间： | 2007-11-20 |
| 修稿时间： | 2007-12-14 |
Novel method for culturing cat's corneal endothelial cells in vitro |
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| LU Wen-Juan,FU Yao,SHAO Chun-Yi,FAN Xian-Qun.Novel method for culturing cat''''s corneal endothelial cells in vitro[J].Recent Advances in Ophthalmology,2008,28(2):81-84. |
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| Authors: | LU Wen-Juan FU Yao SHAO Chun-Yi FAN Xian-Qun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cat cornea endothelial cell culture |
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