| 蓝舌病病毒血清1型VP2与VP5、VP3与VP7两组蛋白在杆状病毒系统中的表达与鉴定 |
| |
| 引用本文： | 李占鸿,杨恒,宋子昂,高林,李华春,廖德芳.蓝舌病病毒血清1型VP2与VP5、VP3与VP7两组蛋白在杆状病毒系统中的表达与鉴定[J].中国动物检疫,2019,36(5):77-84. |
| |
| 作者姓名： | 李占鸿 杨恒 宋子昂 高林 李华春 廖德芳 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31760744）；国家公益性行业（农业）科研专项（201303035）；云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目（2017HB055） |
| |
| 摘 要： | 为表达具有天然构象的蓝舌病病毒血清1型（BTV1）主要结构蛋白VP2、VP3、VP5和VP7，研制针对流行于我国的BTV1型毒株的病毒样颗粒（virus-like particles，VLP）疫苗提供基础，将编码BTV1 VP2和VP5蛋白的基因分别克隆到双表达载体pFastBacDual 的启动子pPH和pP10下游，构建重组质粒pFastBacDual-BTV1-VP2-VP5，将重组质粒转化DH10Bac感受态细胞，获得重组穿梭质粒rBacmidBTV1-VP2-VP5，转染Sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒rBacBTV1-VP2-VP5；按照同样策略，制备重组杆状病毒rBacBTV1-VP3-VP7。使用兔抗BTV1-VP5蛋白多克隆抗体和鼠抗BTV-VP7蛋白单克隆抗体，分别对rBacBTV1-VP2-VP5和rBacBTV1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行间接免疫荧光试验（IFA）检测，结果病毒感染细胞可见特异性荧光出现；使用兔抗BTV1-VP2蛋白多克隆抗体和兔抗BTV1-VP3 蛋白多克隆抗体，分别对rBacBTV1-VP2-VP5和rBacBTV1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行Western-blot检测，可见相对分子质量约100 kDa左右的条带，大小与预期相符。IFA检测和Western Blot检测结果显示，BTV1 VP2、VP3、VP5和 VP7蛋白均得以表达，且具有良好的反应原性。
|
| 关 键 词： | 蓝舌病病毒血清1型 主要结构蛋白 杆状病毒表达 |
|
| 点击此处可从《中国动物检疫》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国动物检疫》下载全文 |
|
