| 链亲和素-磁性微粒的制备及其应用 |
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| 引用本文： | 张志锋,朱宏莉,唐一通,崔婷,耿婷婷,陈超,崔亚丽.链亲和素-磁性微粒的制备及其应用[J].中国科学B辑,2006,36(4):353-360. |
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| 作者姓名： | 张志锋 朱宏莉 唐一通 崔婷 耿婷婷 陈超 崔亚丽 |
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| 作者单位： | 1. 西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心,西安,710069
2. 陕西西大北美基因股份有限公司,西安,710069
3. 西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心,西安,710069;陕西西大北美基因股份有限公司,西安,710069 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号:20273050)，国家高科技发展计划(批准号:2005AA205220)资助项目 |
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| 摘 要： | 通过物理吸附和共价作用机制, 制备两种链亲和素-磁性微粒, 即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒, 并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究; 采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁性微粒对游离生物素的结合能力; 分别以紫外吸收和固相核酸杂交方法, 测定两种链亲和素-磁性微粒对生物素标记寡核苷酸探针的固定化容量及活性, 并与Dynabeads®M-270 Streptavidin进行比较. 结果表明: 通过物理吸附作用制备的链亲和素-金磁微粒, 适用于核酸杂交与检测常用的STE (Tris-NaCl-EDTA) 缓冲系统, 通过共价作用形成的链亲和素-氨基磁粒, 适用于STE和磷酸盐(PBS)缓冲系统; 1 mg链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒对游离生物素的最大结合容量分别为4950和5115 pmol; 对生物素标记寡核苷酸探针(24 mer) 的结合容量分别为2839和2978 pmol, 测定结果均是Dynabeads®M-270 Streptavidin的6~7倍; 与FITC-标记互补寡核苷酸的杂交结果表明, 固定于链亲和素-磁性微粒表面的寡核苷酸探针保持了较好的生物学活性.
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| 关 键 词： | 链亲和素 磁性微粒 制备 应用 |
| 收稿时间： | 2005-10-15 |
| 修稿时间： | 2005年10月15 |
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