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响应面优化南极磷虾蛋白酶解工艺及蛋白肽组分分析
引用本文:刘云姣,张海燕,刘淑晗,汪宇,韩峰,孔聪,王媛,张璇,沈晓盛.响应面优化南极磷虾蛋白酶解工艺及蛋白肽组分分析[J].现代食品科技,2019,35(1):144-151.
作者姓名:刘云姣  张海燕  刘淑晗  汪宇  韩峰  孔聪  王媛  张璇  沈晓盛
作者单位:上海海洋大学食品学院,上海201306;中国水产科学研究院东海水产研究所,上海200090;中国水产科学研究院东海水产研究所,上海,200090
基金项目:国家自然科学基金项目(31471672);上海市自然科学基金项目(17ZR1439400);中央级公益性科研院所基本科研业务费(1893-Z)
摘    要:以南极磷虾蛋白酶解液中的氨基氮含量为指标,采用甲醛电位滴定法测定胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶6种生物酶在其最适酶解条件下对南极磷虾蛋白酶解效果,筛选出酶解南极磷虾蛋白最佳生物酶。在单因素试验基础上,以酶解液中氨基氮含量为响应值,选择酶解温度、时间、pH为自变量,通过三因素三水平Box-Bohnken响应面分析法对筛选出来的生物酶解工艺进行优化。在优化酶解工艺的基础上,利用SDS-PAGE凝胶电泳方法分析南极磷虾酶解蛋白肽及南极磷虾蛋白的分子量分布范围。结果表明:胰蛋白酶为酶解南极磷虾蛋白的理想蛋白酶;响应面分析法建立二次多项回归方程:Y=51.07-0.83A+1.72B-2.06C+0.25AC+1.15BC-3.06A2-2.77B2-3.69C2,模型p0.0001,而失拟项p0.05,表明模型极显著且比较稳定,通过模型分析得最佳条件:酶解温度44.48℃、酶解时间8.52 h、pH 7.88,考虑实际应用可行性,我们在酶解温度45.0℃、酶解时间8.5 h,pH 7.9条件下实验得到的氨基氮含量为50.96±1.07mg/g,与理论预测值51.57mg/g基本一致。通过电泳分析得到南极磷虾蛋白分子量范围在15 ku以上,主要集中分子量范围为15 ku~45 ku;胰蛋白酶解多肽分子量在25 ku以下,主要分子量分布在5 ku以下。

关 键 词:南极磷虾  甲醛电位滴定法  生物酶  响应面法  SDS-PAGE
收稿时间:2018/9/3 0:00:00

Response Surface Optimization of Proteolytic Process and Protein Peptide Composition Analysis of Antarctic Krill
LIU Yun-jiao,ZHANG Hai-yan,LIU Shu-han,WANG Yu,HAN Feng,KONG Cong,WANG Yuan,ZHANG Xuan and SHEN Xiao-sheng.Response Surface Optimization of Proteolytic Process and Protein Peptide Composition Analysis of Antarctic Krill[J].Modern Food Science & Technology,2019,35(1):144-151.
Authors:LIU Yun-jiao  ZHANG Hai-yan  LIU Shu-han  WANG Yu  HAN Feng  KONG Cong  WANG Yuan  ZHANG Xuan and SHEN Xiao-sheng
Affiliation:(1.College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China) (2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China),(2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China),(1.College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China) (2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China),(1.College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China) (2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China),(2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China),(2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China),(2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China),(2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China) and (2.East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China)
Abstract:
Keywords:Antarctic krill  formaldehyde potentiometric titration  biological enzyme  response surface methodology  SDS-PAGE
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