人类胞内氯离子通道蛋白3在原核细胞及真核细胞内的表达 |
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引用本文: | 李春雨,潘林鑫,刘晓颖,范礼斌.人类胞内氯离子通道蛋白3在原核细胞及真核细胞内的表达[J].安徽医科大学学报,2014,0(9):1202-1205. |
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作者姓名: | 李春雨 潘林鑫 刘晓颖 范礼斌 |
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作者单位: | 安徽医科大学生命科学学院生物学系,合肥,230032;安徽医科大学生命科学学院生物学系,合肥,230032;安徽医科大学生命科学学院生物学系,合肥,230032;安徽医科大学生命科学学院生物学系,合肥,230032 |
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基金项目: | 安徽省教育厅自然科学重点科研项目,国家自然科学基金青年基金,安徽省自然科学基金,安徽医科大学博士基金 |
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摘 要: | 目的研究人类胞内氯离子通道蛋白3(CLIC3)在真核细胞中的定位和表达,及其GST融合蛋白在原核细胞中的表达。方法以含人CLIC3的全长cDNA序列的质粒为模板,PCR扩增CLIC3片段,构建真核表达载体pcDNA3.1-CLIC3-FLAG,检测其定位及表达;构建原核表达载体pGEX-5X-3-CLIC3,转化到大肠杆菌 BL21菌株,IPTG诱导融合蛋白GST-CLIC3表达。结果细胞免疫荧光结果表明 CLIC3在COS7细胞质和细胞核中均有分布;Western blot结果显示CLIC3在HEK-293T细胞中能有效表达;考马斯亮蓝染色结果表明融合蛋白GST-CLIC3在BL21菌株中能有效表达。结论人类的CLIC3蛋白COS7、HEK-293T及大肠杆菌BL21菌株均能有效表达,为进一步了解CLIC3的功能奠定了一定的基础。
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关 键 词: | CLIC3 细胞定位 蛋白表达 |
The expression of human intracellular chloride channel protein 3 in eukaryotic and prokaryotic cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | CLIC3 cellular localization protein expression |
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