| 人RACK1蛋白在HEK-293 T和BL21细胞中的表达及COS7细胞的定位 |
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| 引用本文： | 乔正,赵健,潘林鑫,李春雨,徐雪琴,刘晓颖,范礼斌.人RACK1蛋白在HEK-293 T和BL21细胞中的表达及COS7细胞的定位[J].安徽医科大学学报,2014,0(9):1189-1192. |
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| 作者姓名： | 乔正 赵健 潘林鑫 李春雨 徐雪琴 刘晓颖 范礼斌 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学生命科学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生命科学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生命科学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生命科学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生命科学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生命科学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学生命科学院生物学教研室,合肥,230032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年基金，安徽省自然科学基金，安徽省教育厅自然科学重点科研项目 |
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| 摘 要： | 目的构建可以表达有活性的蛋白激酶 C 受体(RACK1)的重组质粒，检测其在细胞内的表达与定位情况。方法设计上下游引物，以RACK1全长cDNA序列为模板， PCR扩增出 RACK1序列，分别构建到载体 pcDNA3.1和pGEX-5X-3。转染pcDNA3.1-FLAG-RACK1到人胚胎肾细胞(HEK-293T)和非洲绿猴肾成纤维细胞(COS7细胞)，转化pGEX-5X-3-RACK1到大肠杆菌 BL21感受态细胞中表达， Western blot法和考马斯亮蓝染色法检测RACK1表达情况，免疫荧光法研究其细胞内定位。结果成功构建了 pcD-NA3.1-FLAG-RACK1和GEX-5X-3-RACK1重组质粒。 West-ern blot证明了其在HEK-293T细胞中的表达，考马斯亮蓝染色显示其在BL21菌株也能大量表达，免疫荧光显示RACK1在COS7的细胞核与细胞质中均有分布。结论人RACK1在HEK-293T细胞和BL21菌株中均能有效表达，在COS7细胞的胞质、胞核均有分布，为进一步研究人RACK1基因的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | RACK1 基因表达 细胞定位 BL21 |
The expression of human RACK1 in HEK-293 T and BL21 and localization in COS7 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RACK1 gene expression localization BL21 |
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