| REGgamma基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 田甜,王小毅,李佳,李凡,任国胜. REGgamma基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响[J]. 中国肿瘤临床, 2008, 35(20): 1196-1199 |
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| 作者姓名： | 田甜 王小毅 李佳 李凡 任国胜 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院普外科,重庆市,400016 |
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| 摘 要： | 目的:探讨蛋白酶体激活因子REGgamma(REGγ)基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的作用.方法:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ,通过脂质体转染将REGγ基因导入MCF-7,以G418(800mg/L)连续筛选获得稳定高表达REGγ基因的细胞株,以转染空载体和未转染细胞作为对照.分别利用MTT法及免疫细胞化学方法检测各组细胞PCNA的表达分析REGγ基因对细胞增殖的影响;以Caspase-3分光光度法及AnnexinV-FITC的流式细胞仪(FCM)来检测细胞凋亡的变化;以透射电镜(TEM)观察细胞超微结构的改变.结果:获得稳定转染且高表达REGγ的细胞株.经Western Blot检测转染REGγ基因的细胞(实验组),其REGγ蛋白表达明显高于对照组细胞(P＜0.05);未转染组、空载体组和实验组细胞的倍增时间分别为34.6、35.1、26.7h.提示实验组细胞倍增时间缩短;MTT法绘制生长曲线提示实验组细胞生长明显加速;免疫细胞化学检测PCNA结果显示,未转染组、空载体组和实验组细胞的染色灰度值分别为89.61±14.32、87.95±16.38、133.47±8.14,表明实验组细胞PCNA表达明显增强(P＜0.01);Caspase-3分光光度法检测显示,实验组细胞的OD值普遍低于对照组(P＜0.05);Annexin V-FITC的FCM检测显示,实验组细胞的凋亡率明显低于对照组(P＜0.01);TEM观察实验组细胞表现为核仁肥大,线粒体、高尔基体丰富或扩张,未见凋亡小体形成.结论:REGγ基因具有促进乳腺癌MCF-7细胞增殖并抑制其凋亡的作用.
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| 关 键 词： | REGgamma基因 乳腺癌 MCF-7细胞 细胞增殖 细胞凋亡 |
The Effect of REGy Gene Expression on the Proliferation and Apoptosis of MCF-7 Human Breast Cancer Cells |
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| TIAN Tian,WANG Xiaoyi,LI Jia,LI Fan,REN Guosheng. The Effect of REGy Gene Expression on the Proliferation and Apoptosis of MCF-7 Human Breast Cancer Cells[J]. Chinese Journal of Clinical Oncology, 2008, 35(20): 1196-1199 |
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| Authors: | TIAN Tian WANG Xiaoyi LI Jia LI Fan REN Guosheng |
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| Affiliation: | TIAN Tian,WANG Xiaoyi,LI Jia,LI Fan,REN Guosheng Department of General Surgery,The First Affiliated Hospital,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China |
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