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| 溶氧反馈-补料分批技术高密度培养基因重组MAGE1/HSP70/MAGE3工程菌 | |
| 引用本文： | 胡沛臻,温江田,路凡,王孝功,李侠,司少艳,葛伟,黄杨,张秀敏,隋延仿.溶氧反馈-补料分批技术高密度培养基因重组MAGE1/HSP70/MAGE3工程菌[J].第三军医大学学报,2007,29(16):1576-1579. |
| 作者姓名： | 胡沛臻 温江田 路凡 王孝功 李侠 司少艳 葛伟 黄杨 张秀敏 隋延仿 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院病理科,西安,710032 2. 第四军医大学西京医院超声诊断科,西安,710032 3. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,西安,710032 |
| 摘 要： | 目的 建立人黑色素瘤抗原MAGE1/HSP70/MAGE3融合蛋白基因重组工程菌E.coli.BL21/pET-MHM的高密度发酵工艺.方法 以摇瓶发酵结果为基础,扩大至NBS Bioflo Ⅳ 20 L发酵罐发酵,利用溶氧反馈-补料分批培养技术,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如发酵培养基、活化时间、诱导浓度及时间、pH值及分批补加营养物质等进行优化.结果 保持培养过程中40%的溶解氧,采用半合成培养基、活化至对数生长期时0.2 mmol/L IPTG诱导5 h以及以甘油为碳源连续流加补料的条件发酵,连续3批重复发酵,最终菌密度D(600)均达45～50时,菌体量可提高至70 g/L以上,目的蛋白的表达量占菌体蛋白总量的38%以上.结论 确定了周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺. |
| 关 键 词： | 黑色素瘤抗原 重组 大肠杆菌 发酵 |
| 文章编号： | 1000-5404（2007）16-1576-04 |
| 修稿时间： | 2006-08-21 |
Preparation of gene recombinant MAGE1/HSP70/MAGE3 by high cell density culture of E.coli.with DO fed-back control of nutrient feeding |
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| HU Pei-zhen,WEN Jiang-tian,LU Fan,WANG Xiao-gong,LI Xia,SI Shao-yan,GE Wei,HUANG Yang,ZHANG Xiu-min,SUI Yan-fang.Preparation of gene recombinant MAGE1/HSP70/MAGE3 by high cell density culture of E.coli.with DO fed-back control of nutrient feeding[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2007,29(16):1576-1579. | |
| Authors: | HU Pei-zhen WEN Jiang-tian LU Fan WANG Xiao-gong LI Xia SI Shao-yan GE Wei HUANG Yang ZHANG Xiu-min SUI Yan-fang |
| Abstract: | |
| Keywords: | melanoma antigen-associated gene recombination Escherichia coli fermentation |
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