用差示PCR法筛选类风湿性关节炎滑膜细胞中的高表达基因

目的 筛选类风湿性关节炎（RA）滑膜细胞中的高表达基因，以探讨RA滑膜细胞发生肿瘤样增殖和侵蚀软骨的分子机理。方法 以骨性关节炎（osteoarthritis,OA)滑膜细胞作对照，采用差示PCR（differentially display PCR)方法，克隆RA滑膜细胞中高表达的cDNAs片段，经反向点杂交排除假阳性克隆后，将阳性克隆进行基因序列分析，结果共回收76仆差异条带，得到42个有插段的克隆，经反向点杂交后得到22个阳性克隆，对其中19个克隆进行基因序列分析表明，最长片段为501bp长，最短片段为145bp长，大部分在300bp，有13个克隆为已知基因，其中包括组织蛋白酶，其它6个克隆为未知序列，这些未知序列中除一个序列外酶，其它6个克隆为未知序列，这些未知序列中除一个序列外都为基因的非编码区，结论 差示PCR方法在筛选差异表达基因方面存在着很大的局限性，组织蛋白酶B可能与RA滑膜细胞的软骨侵蚀性有关。

Identification of multiple, differentially expressed messenger RNAs in fibroblast-like synovial cells from patients with rheumatoid arthritis