| 绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株囊膜蛋白基医在大肠杆菌中的分段表达 |
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| 引用本文： | 斯日古楞 么宏强 马学恩 王升启. 绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株囊膜蛋白基医在大肠杆菌中的分段表达[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2007, 0(10): 7-10 |
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| 作者姓名： | 斯日古楞 么宏强 马学恩 王升启 |
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| 作者单位： | [1]内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古呼和浩特010018 [2]中国军事医学科学院,北京100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（30260083）;教育部高等学校博士点专项科研基金项目（20040129001） |
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| 摘 要： | 为了建立原核高效表达体系，从自然感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株的肺肿瘤组织中提取基因组DNA，应用PCR技术分别扩增编码囊膜蛋白（env）基因的表面蛋白（surfaceprotein，su）和跨膜蛋白（transmembrane protein，TM）区域基因，通过T—A克隆的方法分别克隆入pGEM—TEasy载体中，然后利用设计的起始密码、终止密码以及相应酶切位点的引物，把env基因的SU区和TM区基因亚克隆到表达载体pGEX-4T～1中，分别构建SU和TM的重组表达质粒，经酶切、PCR及DNA测序鉴定后，将阳性质粒转化入大肠杆菌BL21CodonPlus中并在IPTG的诱导下表达，表达产物用SDS—PAGE分析鉴定。结果表明，该基因可以在大肠杆菌中以稳定的包涵体形式高效表达，表达的SU和TM融合蛋白表观分子质量约为68ku和46ku，表达量分别占全菌蛋白的25％和30％，并且从包涵体分离纯化得到的表达蛋白具有较高纯度，是一种理想的免疫原。
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| 关 键 词： | 绵羊肺腺瘤病 绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株 囊膜蛋白 基因克隆 表达 |
| 文章编号： | 1004-7034（2007）10-0007-04 |
| 收稿时间： | 2006-11-27 |
| 修稿时间： | 2006-11-272007-08-22 |
Cloning and Expressing of Capsid Protein Gene of Jaagsiekte Sheep Retrovirus Nei Meng Strain in E. coli |
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| Siriguleng, YAO Hong - qiang , MA Xue - en , et al. Cloning and Expressing of Capsid Protein Gene of Jaagsiekte Sheep Retrovirus Nei Meng Strain in E. coli[J]. Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine, 2007, 0(10): 7-10 |
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| Authors: | Siriguleng YAO Hong - qiang MA Xue - en et al |
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| Affiliation: | 1. College of Animal Science and Animal Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Huhhot 010018 ,China; 2. China Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sheep pulmonary adenomatosis Jaagsiekte sheep retrovirus Nei Meng Strain envelope protein genetic cloning expression |
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