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聚合酶链式反应技术快速检测原料乳中荧光假单胞菌
引用本文:步雨珊,乔文君,黄冬成,刘银雪,公丕民,刘同杰,张兰威,易华西.聚合酶链式反应技术快速检测原料乳中荧光假单胞菌[J].食品安全质量检测技术,2022,13(15):4766-4772.
作者姓名:步雨珊  乔文君  黄冬成  刘银雪  公丕民  刘同杰  张兰威  易华西
作者单位:中国海洋大学食品科学与工程学院,中国海洋大学食品科学与工程学院,黑龙江大三源乳品机械有限公司,中国海洋大学食品科学与工程学院,中国海洋大学食品科学与工程学院,中国海洋大学食品科学与工程学院,中国海洋大学食品科学与工程学院,中国海洋大学食品科学与工程学院
基金项目:国家重点研发计划项目(2018YFC1604305)、国家自然科学基金项目(31571850)
摘    要:目的 利用PCR(polymerase chain reaction)技术建立一种快速、准确检测原料乳中最常见有害嗜冷微生物——荧光假单胞菌的方法。方法 以荧光假单胞菌蛋白酶基因aprX为检测靶标,设计特异性PCR简并引物,建立原料乳中荧光假单胞菌PCR检测体系,对该体系的特异性及检测限进行评价。结果 筛选到特异性引物F3:5’-WSNGGNGGNGAYTTYCAYATGAC-3’;R3:5’-RTCRTTNCCNCCNCCRTCCC-3’,建立了最佳PCR检测体系:引物浓度0.5 μmol/L、Taq DNA聚合酶添加量0.4 μL、dNTPs浓度0.16 mmol/L、Mg2+浓度1.6 mmol/L,退火温度56.4 ℃,扩增35个循环。此检测方法对荧光假单胞菌具有特异性,检测限为2.57×103 CFU/mL。结论 本方法操作简便,特异性强,检测限低,对快速检测原料乳中嗜冷菌,保障原料乳品质与安全具有一定参考意义。

关 键 词:嗜冷菌  荧光假单胞菌  原料乳  PCR  检测
收稿时间:2022/3/4 0:00:00
修稿时间:2022/7/20 0:00:00

Rapid detection of Pseudomonas fluorescens in raw milk based on polymerase chain reaction assay
BU Yu-Shan,QIAO Wen-Jun,HUANG Dong-Cheng,LIU Yin-Xue,GONG Pi-Min,LIU Tong-Jie,ZHANG Lan-Wei,YI Hua-Xi.Rapid detection of Pseudomonas fluorescens in raw milk based on polymerase chain reaction assay[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2022,13(15):4766-4772.
Authors:BU Yu-Shan  QIAO Wen-Jun  HUANG Dong-Cheng  LIU Yin-Xue  GONG Pi-Min  LIU Tong-Jie  ZHANG Lan-Wei  YI Hua-Xi
Affiliation:College of Food Science and Engineering,Ocean University of China,College of Food Science and Engineering,Ocean University of China,Dairy Products Machinery Company Limited of Dasanyuan Heilongjiang,College of Food Science and Engineering,Ocean University of China,College of Food Science and Engineering,Ocean University of China,College of Food Science and Engineering,Ocean University of China,College of Food Science and Engineering,Ocean University of China,College of Food Science and Engineering,Ocean University of China
Abstract:
Keywords:psychrophilic bacteria  P  fluorescens  raw milk  PCR  detection
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