| 经典H-2分子mRNA探针的制备及在C57小鼠中枢神经系统原位杂交中的应用 |
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| 引用本文： | 刘建娥,沈宇清,李明莉,吴晓箐,史茜,张建琼. 经典H-2分子mRNA探针的制备及在C57小鼠中枢神经系统原位杂交中的应用[J]. 东南大学学报(医学版), 2013, 32(2): 135-140 |
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| 作者姓名： | 刘建娥 沈宇清 李明莉 吴晓箐 史茜 张建琼 |
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| 作者单位： | 东南大学医学院,病原生物学与免疫学系,发育与疾病相关基因教育部重点实验室,江苏,南京,210009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，教育部博士点基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:研究经典H-2基因在C57小鼠中枢神经系统中的表达谱,设计合成地高辛标记的经典H-2 mRNA探针.方法:利用PCR扩增出针对经典H-2分子的特异性保守片段,然后将PCR产物纯化后与pGEM-T Easy载体连接,转化到大肠杆菌DH5α中.测序后获得目的基因的单克隆,扩增并提取质粒,采用体外转录的方法合成地高辛标记的经典H-2 mRNA的正、反义RNA探针.运用原位杂交方法分析经典H-2基因在C57小鼠中枢神经系统中的表达情况.结果:成功构建了321 bp经典H-2 mRNA的正、反义探针,原位杂交方法检测到经典H-2 mRNA在出生后15 d小鼠中枢神经系统中反义探针有杂交信号,正义探针无杂交信号.结论:正义探针无杂交信号表明合成的321 bp经典H-2 mRNA反义探针具有特异性.
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| 关 键 词： | 中枢神经系统 经典H-2 原位杂交 探针 小鼠 |
Preparation of classical H-2 mRNA probe and the application in situhybridization in the central nervous system of C57 mice |
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| LIU Jian-e , SHEN Yu-qing , LI Ming-li , WU Xiao-jing , SHI Qian , ZHANG Jian-qiong. Preparation of classical H-2 mRNA probe and the application in situhybridization in the central nervous system of C57 mice[J]. Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed, 2013, 32(2): 135-140 |
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| Authors: | LIU Jian-e SHEN Yu-qing LI Ming-li WU Xiao-jing SHI Qian ZHANG Jian-qiong |
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