RNAi沉默XIAP基因抑制MG-63细胞增殖及其分子机制 |
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引用本文: | 何畔,梁珊,王愉思,魏磊平,阎戈,康亦峰,王靖. RNAi沉默XIAP基因抑制MG-63细胞增殖及其分子机制[J]. 江苏医药, 2011, 37(2) |
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作者姓名: | 何畔 梁珊 王愉思 魏磊平 阎戈 康亦峰 王靖 |
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作者单位: | 1. 湖南省人民医院骨科,长沙市,410005 2. 湖南省人民医院临床医学研究所,长沙市,410005 |
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摘 要: | 目的 探讨RNA干扰(RNAi)抑制NC-63骨肉瘤细胞X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因的表达及其抗肿瘤的机制.方法 构建XIAP基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体.将NC-63细胞分为空白组(A组),用空白质粒psiRNA-Con转染(B组),用psiRNA-XIAP转染(C gt).Westernblot检测XIAP蛋白的表达;MTT检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期、凋亡及半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)的表达;ELISA法检测细胞内血管内皮生长因子(VEGF)含量.结果 与A、B组比较,C组细胞XIAP蛋白水平、MTT值及VEGF含量均显著降低,细胞凋亡率、Caspase-9蛋白表达及G2/M期细胞所占比例增高(P<0.05).结论 RNAi能有效抑制XIAP基因表达,抑制骨肉瘤细胞增殖活性,诱导其凋亡.其机制可能涉及Caspase家族凋亡信号转导通路的活化、DNA合成及肿瘤血管生成的抑制.
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关 键 词: | RNA干扰 X-连锁凋亡抑制蛋白 骨肉瘤 |
Inhibitory effect of XIAP gene silencing induced by RNA interference on MG-63 cells and its mechanism |
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Abstract: | Objective To investigate the inhibitory effect of RNA interferece (RNAi) on the expression of X-linked inhibitor of apoptosis protein(XIAP) gene in MG-63 osteosarcoma cells and its anti-tumor mechanism.Methods The plasmid for expressing short hairpin RNA(shRNA) targeting XIAP gene was constructed.MG-63 cells were conventionally cultured and divided into groups of A(non-transfenction),B(blank plasmid psiRNA-Con transfencted) and C(psiRNA-XIAP transfected).XIAP expression in MG-63 cells was detected by Wester... |
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Keywords: | RNA interference X-linked inhibitor of apoptosis protein Osteosarcoma |
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