| 蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化 |
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| 引用本文： | 李民,杨青,包永明,雷旭宇,许建强,安利佳. 蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化[J]. 食品与生物技术学报, 2003, 22(2): 22-25 |
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| 作者姓名： | 李民 杨青 包永明 雷旭宇 许建强 安利佳 |
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| 作者单位： | 大连理工大学生物工程系,辽宁,大连,116024 |
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| 基金项目： | 辽宁省科技基金项目(No.99305001)资助课题. |
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| 摘 要： | 将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin)基因克隆到载体pET32-a(+)上,在T7lac启动子下以N端融合硫氧还蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,诱导条件为:30℃诱导6 h,IPTG浓度为1 mmol/L.利用固定化金属离子(Ni2+)亲和层析分别对胞内可溶物和变性条件下的包涵体进行纯化.通过SDS-PAGE检测融合蛋白的纯度,采用点杂交和纤维蛋白凝结活性检测分析,显示纯化产物具有较高生物活性.
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| 关 键 词： | 类凝血酶 固定化金属亲和层析 融合表达 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 1009-038X(2003)02-0022-04 |
| 修稿时间： | 2002-11-26 |
Fusion Expression and Purification of Gloshedobin, a Thrombin-Like Enzyme from Gloydius Shedaoensis in E. coli |
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| LI Min,YANG Qing,BAO Yong-ming,LEI Xu-yu,XU Jian-qiang,AN li-jia. Fusion Expression and Purification of Gloshedobin, a Thrombin-Like Enzyme from Gloydius Shedaoensis in E. coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2003, 22(2): 22-25 |
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| Authors: | LI Min YANG Qing BAO Yong-ming LEI Xu-yu XU Jian-qiang AN li-jia |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | thrombin-like enzyme immobilized metal affinity chromatography fusion expression E. coli |
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