| NF-κB decoy寡核苷酸增强阿霉素对肝癌耐药细胞株HepG2/ADM化疗敏感性的研究 |
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| 引用本文： | 严斌,陈孝平,张万广,兰明银. NF-κB decoy寡核苷酸增强阿霉素对肝癌耐药细胞株HepG2/ADM化疗敏感性的研究[J]. 中华肝胆外科杂志, 2004, 10(10): 691-695 |
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| 作者姓名： | 严斌 陈孝平 张万广 兰明银 |
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| 作者单位： | 1. 430030,武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心
2. 442000,十堰市,湖北省十堰市太和医院肝胆移植外科 |
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| 基金项目： | 卫生部临床重点学科项目 (2 0 0 1) |
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| 摘 要： | 目的研究NF-κB decoy寡核苷酸增强肝癌耐药细胞株HepG2／ADM对阿霉素化疗敏感性的变化。方法通过培养液中阿霉素(adriamycin，ADM)的浓度梯度增加法，长期筛选培养，建立肝癌HepG2／ADM耐药细胞株，荧光定量PCR检测MDRl的表达，转染FITC标记的NF-κB decoy寡核苷酸，通过荧光显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位的观察，凝胶迁移率实验检测转染前后NF-κB结合活性的变化，加入化疗药物阿霉素(ADM)，MTT比色法检测细胞增殖，细胞凋亡采用流式细胞仪和TUNEL法检测观察转染NF-κB decoy寡核苷酸后肝癌耐药细胞对化疗药物的敏感性变化。结果HepG2／ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型，转染荧光标记的NF-κB decoy寡核苷酸1h，倒置荧光显微镜和共聚焦显微镜显示定位于细胞核内，凝胶阻滞分析实验(electrophoreretic mobility shift assay，EMSA)分析示NF-κB decoy寡核苷酸能够降低NF-κB核内结合，加入化疗ADM(0．1mg／L)后，MTT显示HepG2／ADM细胞的增殖明显抑制，ADM作用24h后出现细胞凋亡，流式细胞术、TUNEL法检测NF-κB decoy寡核苷酸转染HepG2／ADM细胞诱导的凋亡，与对照组相比，凋亡指数增加。结论NF-κB decoy寡核苷酸转染肝癌耐药细胞株HepG2／ADM后，能够抑制NF-κB的激活，逆转耐药细胞对化疗药物的耐受，增加其对化疗药物的敏感性。
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| 关 键 词： | NF-κB ADM HepG2 寡核苷酸 肝癌 耐药细胞株 转染 共聚焦显微镜 结合活性 荧光显微镜 |
| 修稿时间： | 2003-03-24 |
A double-strand decoy DNA oligonucleotides for NF-κB-induced apoptosis and sensitization of hepatic cancer cells to chemotherapy |
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