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沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤作用的体外实验研究
引用本文:柯山,陈雪华,蔡劬,李建芳,俞焙秦,顾琴龙,朱正纲,刘炳亚. 沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤作用的体外实验研究[J]. 中华普通外科杂志, 2007, 22(4): 291-294
作者姓名:柯山  陈雪华  蔡劬  李建芳  俞焙秦  顾琴龙  朱正纲  刘炳亚
作者单位:200025,上海交通大学医学院瑞金医院消化外科研究所
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30471961、30670939)
摘    要:目的初步观察用小分子干扰RNA(siRNA)沉默树突状细胞(DCs)恒定链(Ii)后,DCs疫苗的体外抗肿瘤效果。方法从小鼠骨髓分离骨髓前体细胞,细胞经100 ng/ml GM-CSF和100 ng/ml IL-4诱导培养6 d后,转染针对DCs Ii链特异的Ii-siRNA,转染后加用50 ng/ml TNF-α继续诱导细胞成熟48 h,然后分别用Western blot检测沉默效果及CCK-8试剂盒检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力;此外,DCs共转染Ii-siRNA和小鼠胃癌前体细胞MFC的总RNA后,与同种异体淋巴细胞共培养,通过ELISA检测培养上清IFN-γ/和IL-4的水平,并收集致敏淋巴细胞进行体外杀伤实验。结果Ii-siRNA明显抑制DCs Ii的表达。沉默Ii链能够增强DCs的淋巴细胞增殖能力,并促使淋巴细胞向Th1的方向漂移[IFN-γ:(5107±351)pg/ml,IL-4:(65±13)pg/ml,P<0.05]。淋巴细胞经共转染Ii-siRNA和MFC RNA的DCs激活后,明显而特异地杀伤靶肿瘤细胞(杀伤百分率: 66.94%±2.75%,P<0.05)。结论通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。

关 键 词:RNA干扰 免疫 细胞 树突状细胞 小鼠
收稿时间:2006-10-17

In vitro anti-tumor effect of invariant chain silenced dendritic cells
KE Shan,CHEN Xue-hua,CAI Qu,LI Jian-fang,YU Bei-qin,GU Qin-long,ZHU Zheng-gang,LIU Bing-ya. In vitro anti-tumor effect of invariant chain silenced dendritic cells[J]. Chinese Journal of General Surgery, 2007, 22(4): 291-294
Authors:KE Shan  CHEN Xue-hua  CAI Qu  LI Jian-fang  YU Bei-qin  GU Qin-long  ZHU Zheng-gang  LIU Bing-ya
Abstract:
Keywords:RNA interference   Immunity, cellular   Dendritic cells   Mice
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