| 人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达 |
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| 引用本文： | 颜卫华,范丽安. 人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达[J]. 免疫学杂志, 2003, 19(1): 7-10 |
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| 作者姓名： | 颜卫华 范丽安 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学上海市免疫学研究所,上海,200025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 0 70 784 )，上海市科委重点项目 (0 2DJ14 0 5 4 )资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G，HLA-G)突变体cDNA，并使其在HLA-I类阴性的K562细胞上获得稳定表达，为研究配-受体之间的识别机制奠定基础。方法：用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-GcDNA，得到全长HLA-GPCR产物后，用桥式PCR方法进行定点点突变，将突变的目的基因亚克隆于逆转录，将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体，采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞，最后经G418筛选及有限稀释，利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测，观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达。结果：HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达。结论：成功构建了mG-pLNCX表达载体，并使HLA-G突变体分子在HLA-I类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达。
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| 关 键 词： | 人类白细胞抗原－G K562细胞 HLA－G 克隆 点突变 RT－PCR方法 |
| 文章编号： | 1000-8861(2003)01-0007-04 |
Cloning and expression of human leukocyte antigen-G mutant cDNA on K562 cell |
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| YAN Wei hua,FAN Li an. Cloning and expression of human leukocyte antigen-G mutant cDNA on K562 cell[J]. Immunological Journal, 2003, 19(1): 7-10 |
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| Authors: | YAN Wei hua FAN Li an |
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| Keywords: | HLA G Mutation Expression vector K562 |
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