| 应用酵母双杂交技术筛选与乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2结合的肝细胞蛋白编码基因 |
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| 引用本文： | 粱赟磊,成军,邢卉春,王琦,李越,张斌,樊万虎,袁菊,张黎颖,洪源. 应用酵母双杂交技术筛选与乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2结合的肝细胞蛋白编码基因[J]. 解放军医学杂志, 2008, 33(7): 793-795 |
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| 作者姓名： | 粱赟磊 成军 邢卉春 王琦 李越 张斌 樊万虎 袁菊 张黎颖 洪源 |
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| 作者单位： | 山西医科大学附属第一医院感染病科,太原,030001;北京地坛医院传染病研究所;北京地坛医院传染病研究所肝病四科 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2(HBEBP2)的真核表达载体并筛选人肝细胞中与HBEBP2相互作用的基因。方法通过PCR扩增获得HBEBP2基因,构建真核表达载体pGBKT7-HBEBP2,转化酵母菌AH109并在其中进行表达。随后与预转化了人肝细胞文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行双重筛选获得阳性克隆。提取文库质粒pACT2-DNA并与pGBKT7-HBEBP2共同转化AH109酵母菌株,于铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行筛选以排除假阳性克隆。挑取真阳性克隆送测序,并进行生物信息学分析。结果筛选出6种与HBEBP2相互作用的蛋白,其中包括人类线粒体蛋白、人类α-2-糖蛋白1、人类磷酸甘露糖-p-长醇利用缺陷1和人类丝氨酸蛋白酶抑制剂等4个已知功能蛋白及2个未知功能序列。结论筛出人肝细胞中一组与HBEBP2相互作用的蛋白,为进一步探讨HBEBP2在HBV致病过程中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 乙型 HBEBP2 双杂交系统技术 蛋白质相互作用 |
Screening exonic genes of proteins in hepatocytes interacting with HBEBP2 by yeast two-hybrid technique |
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| Liang Yunlei,Cheng Jun,Xing Huichun,et al.. Screening exonic genes of proteins in hepatocytes interacting with HBEBP2 by yeast two-hybrid technique[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2008, 33(7): 793-795 |
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| Authors: | Liang Yunlei Cheng Jun Xing Huichun et al. |
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| Affiliation: | Liang Yunlei,Cheng Jun,Xing Huichun,et al.Department of Infectious Disease,First Affiliated Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis B virus HBEBP2 two-hybrid system techniques protein-protein interaction |
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