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免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞
引用本文:浦立勇,王学浩,李相成,张峰,俞悦,姚爱华,成峰,李国强. 免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞[J]. 中国普外基础与临床杂志, 2006, 13(3): 275-278
作者姓名:浦立勇  王学浩  李相成  张峰  俞悦  姚爱华  成峰  李国强
作者单位:南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心,南京,210029
基金项目:中国科学院资助项目;江苏省科技厅青年科学基金
摘    要:目的探索利用磁性细胞分离(MACS)系统高效、快速地分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞.方法采用免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏内的CD4+CD25+调节性T细胞, 首先采用"鸡尾酒"抗体和抗IgG磁珠阴性分选CD4+ T细胞,再用抗CD25-PE抗体和抗PE磁珠阳性分选获得CD4+CD25+T 细胞.分离后的细胞经流式细胞仪检测分离纯度; 台盼蓝染色检测细胞存活率; 体外增殖实验检测其对CD4+CD25-T细胞的免疫抑制作用.结果阴性分选获得的CD4+T细胞纯度为(83.6±2.5)%(79%~87%), 阳性分选后获得的CD4+CD25+T细胞纯度为(90.2±1.8)%(86%~93%), 细胞存活率为(92.8±3.4)%(92%~95%), 体外增殖实验表明,CD4+CD25+T细胞能明显抑制CD4+CD25-T 细胞的增殖(P<0.01). 结论采用MACS系统阴性加阳性分选可以高效、快速地获得理想纯度和有免疫抑制功能的大鼠CD4+CD25+调节性T细胞.

关 键 词:磁性细胞分离  CD4 CD25 调节性T细胞  流式细胞仪技术  大鼠
文章编号:1007-9424(2006)03-0275-04
收稿时间:2005-08-10
修稿时间:2006-02-13

Concentration of Rat Splenic CD4+CD25+ Regulatory T Cell by Magnetic Cell Sorting System in vitro
PU Li-yong,WANG Xue-hao,LI Xiang-cheng,ZHANG Feng,YU Yue,YAO Ai-hua,CHENG Feng,LI Guo-qiang. Concentration of Rat Splenic CD4+CD25+ Regulatory T Cell by Magnetic Cell Sorting System in vitro[J]. Chinese Journal of Bases and Clinics In General Surgery, 2006, 13(3): 275-278
Authors:PU Li-yong  WANG Xue-hao  LI Xiang-cheng  ZHANG Feng  YU Yue  YAO Ai-hua  CHENG Feng  LI Guo-qiang
Abstract:
Keywords:Magnetic cell sorting CD4+CD25+ regulatory T cell Flow cytometry technique Rat
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