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小鼠胚胎Sry基因的RNA干涉研究
引用本文:赵金红,杜卫华,道尔吉,裴杰,张丽,林秀坤.小鼠胚胎Sry基因的RNA干涉研究[J].生物化学与生物物理进展,2006,33(9).
作者姓名:赵金红  杜卫华  道尔吉  裴杰  张丽  林秀坤
作者单位:1. 内蒙古农业大学动物医学与动物科学学院,呼和浩特,010018
2. 中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094
3. 西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100
摘    要:为了研究Sry基因的调控网络,采用siRNA技术使Sry基因沉默,探讨了有效沉默Sry基因的途径和最佳条件.设计、合成针对小鼠Sry基因的发夹状寡核苷酸链,退火后连入真核表达载体pSilencer4.1-CMVneovector,构建以小鼠Sry基因为靶点的siRNA干涉载体pSilencer4.1/Sry217及pSilencer4.1/Sry565,通过尾静脉注射法将载体质粒导入妊娠小鼠体内,于小鼠妊娠第11.5天,即11.5dpc(dayspostcoitum,性交后天数)取出胚胎,采用双重PCR法对胚胎进行性别鉴定,鉴定为雄性的胚胎采用半定量RT-PCR法检测Sry基因的表达量,研究不同干扰序列、不同注射时间及注射剂量对Sry基因表达量的影响.研究结果,确定了质粒的最佳注射时间为9.5dpc,注射剂量为20μg,注射干扰质粒pSilencer4.1/Sry565对Sry基因的抑制效率达85%左右.结果表明,siRNA可以显著抑制雄性胚胎Sry基因的表达.

关 键 词:siRNA  Sry  小鼠胚胎  基因沉默

Study on The RNA Interference of Sry in Mouse Embryos
ZHAO Jin-Hong,DU Wei-Hua,DAO Er-Ji,PEI Jie,ZHANG Li,LIN Xiu-Kun.Study on The RNA Interference of Sry in Mouse Embryos[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2006,33(9).
Authors:ZHAO Jin-Hong  DU Wei-Hua  DAO Er-Ji  PEI Jie  ZHANG Li  LIN Xiu-Kun
Abstract:
Keywords:siRNA  Sry  mouse embryos  gene silencing  
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