单壁碳纳米管对人肝细胞HepG2的毒性和肝代谢酶影响的研究CSCD

目的探究单壁碳纳米管(single-walled carbon nanotube,SWCNT)对人肝癌细胞Hep G2的毒性及对肝代谢酶的影响。方法0.25、0.5和1 mg/ml SWCNT处理Hep G2细胞24、48和72 h,采用噻唑蓝比色法3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]测定SWCNT对肝癌细胞Hep G2增殖的抑制作用。蛋白印迹法(Western blot)检测肝代谢酶儿茶酚-O-甲基转移酶(Catechol-O-methyltransferase,COMT)、谷胱甘肽S转移酶P1(Glutathione S-transferase pi gene,GSTP1)和细胞色素P450亚酶(Cytochrome P450,family 1,subfamily A,CYP1A1)蛋白表达量的变化。酶联免疫吸附(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测细胞上清中相关代谢酶的浓度。结果与对照组相比,0.25、0.5和1 mg/ml的SWCNT对Hep G2细胞的增殖具有明显抑制作用,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,随着药物浓度的增加,COMT、GSTP1和CYP1A1的蛋白水平均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。ELISA实验结果显示,0.5和1 mg/ml的SWCNT处理细胞后,GSTP1和CYP1A1的浓度明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05),而COMT浓度降低,但差异并无统计学意义(P>0.05)。结论与对照组相比,0.25~1 mg/ml的SWCNT可以抑制Hep G2细胞的增殖,且呈一定的剂量和时间依赖性。SWCNT可以一定程度地抑制肝代谢酶COMT、GSTP1和CYP1A1的表达,可能与其导致细胞毒性相关。