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伪旋毛虫肌幼虫cDNA表达文库的构建及筛选
引用本文:吴秀萍,赫荣华,高丽芳,付宝权,王学林,R.Blaga,邓洪宽,于申业,P.Boireau,王峰,刘明远. 伪旋毛虫肌幼虫cDNA表达文库的构建及筛选[J]. 中国人兽共患病杂志, 2008, 24(9)
作者姓名:吴秀萍  赫荣华  高丽芳  付宝权  王学林  R.Blaga  邓洪宽  于申业  P.Boireau  王峰  刘明远
作者单位:[1]人兽共患病教育部重点实验室,吉林大学人兽共患病研究所,长春130062 [2]UMR 956 INRA-AFSSA-ENVA-PUVM, Maison-Alfort, Paris 94703, France
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),国家自然科学基金,国际科学基金(IFS)
摘    要:目的 获取伪旋毛虫(Trichinella pseudospiralis)肌幼虫时期抗原性基因.方法 利用λZAP载体构建伪旋毛虫肌幼虫cDNA表达文库;以感染伪旋毛虫60天后的猪血清为抗体探针,对伪旋毛虫肌幼虫cDNA文库进行免疫学筛选,对筛选出的强反应原性克隆进行测序,利用相关分子生物学软件进行序列分析.结果 构建的伪旋毛虫cDNA表达文库的库容量为0.55×106pfu,重组率为95.6%,扩增后文库滴度为1.2×1010 pfu/mL.从2.0×105个重组噬菌体筛选获得阳性克隆27个.序列分析结果表明这27个阳性克隆共编码7种cDNA分子,其编码的类似蛋白分别为伪旋毛虫Tp21kDa蛋白、伪旋毛虫Tp28kDa蛋白、蛋白酶体激活因子亚单位(Proteasome activator subunit)类蛋白、Nudix水解酶(Nudix hydrolyase)类蛋白、凝集因子(Condensin)类蛋白、尿嘧啶糖基化酶(uracil glycosylase)类蛋白和一个未知蛋白.结论 获得两个反应原性较强且高拷贝的抗原基因,其分别编码Tp21kDa蛋白及蛋白酶体激活因子亚单位.

关 键 词:伪旋毛虫  肌幼虫  cDNA表达文库  构建  筛选

Construction and screening of the cDNA expression library for muscle larvae of Trichinella pseudospiralis
R. Blaga,YU Shen-ye,WU Xiu-ping,GAO Li-fang,ZHANG Ling,FU Bao-quan,WANG Xue-lin,R. Blaga,YANG Zhi-dong,DENG Hong-kuan,YU Shen-ye,P.Boireau,LIU Ming-yuan. Construction and screening of the cDNA expression library for muscle larvae of Trichinella pseudospiralis[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2008, 24(9)
Authors:R. Blaga  YU Shen-ye  WU Xiu-ping  GAO Li-fang  ZHANG Ling  FU Bao-quan  WANG Xue-lin  R. Blaga  YANG Zhi-dong  DENG Hong-kuan  YU Shen-ye  P.Boireau  LIU Ming-yuan
Abstract:
Keywords:
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