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SYBR GreenⅠ实时PCR快速检测沙门菌
引用本文:王耀 郑秋月 曹际娟. SYBR GreenⅠ实时PCR快速检测沙门菌[J]. 中国食品卫生杂志, 2006, 18(4): 314-317
作者姓名:王耀 郑秋月 曹际娟
作者单位:[1]东北大学,辽宁沈阳110004 [2]辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001
摘    要:为应用SYBR GreenⅠ实时PCR技术建立沙门菌的快速检测方法,根据沙门菌invA基因序列的特点设计特异性引物,进行SYBR GreenⅠ实时PCR检测。以沙门菌及非同源性参考菌株做特异性检测;沙门菌不同群菌株做重现性检测;将沙门菌菌株稀释成不同梯度,做灵敏度检测。该方法有较好的特异性、重现性,沙门菌属5个群菌株均为阳性:而其它非同源菌株均为阴性。该方法灵敏度较高,检测低限为19CFU/ml。该方法特异性强,重现性好,敏感性高,可以快速、准确检测食品中沙门菌。应用实时PCR技术,利用SYBR GreenⅠ染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到沙门菌中invA基因特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,且通过熔解曲线可知其熔点值约为80,4℃,而对其它非沙门菌则检测不到荧光信号。SYBR GreenⅠ实时PCR能通过熔解曲线有效地区分特异性产物、非特异性产物以及引物二聚体,是基因鉴定检测的新方法。

关 键 词:聚合酶链反应 沙门氏菌属 基因
文章编号:1004-8456(2006)04-0314-04
收稿时间:2006-01-06
修稿时间:2006-01-06

Identification ofSalmonella in Foods with SYBR(R) Green
WANG Yao,ZHENG Qiu-yue,CAO Ji-juan. Identification ofSalmonella in Foods with SYBR(R) Green[J]. Chinese Journal of Food Hygiene, 2006, 18(4): 314-317
Authors:WANG Yao  ZHENG Qiu-yue  CAO Ji-juan
Abstract:
Keywords:Polymerase Chain Reaction    Salmonella    Gene
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