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Caspase-3在Apoptin基因诱导Hela细胞凋亡中的作用
引用本文:曹婧,赵洪礼,黄敏,戈全治,宁安红.Caspase-3在Apoptin基因诱导Hela细胞凋亡中的作用[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2007,14(4):333-337.
作者姓名:曹婧  赵洪礼  黄敏  戈全治  宁安红
作者单位:1. 大连医科大学,微生物学教研室,大连,116027
2. 沈阳军区联勤部,疾病预防控制中心,分子生物学实验室,沈阳,110034
摘    要:目的:研究Caspase-3在Apoptin gene诱导Hela细胞凋亡中的作用。方法:用含有Apoptin基因的真核表达载体pcDNAA3瞬间转染体外培养的Hela细胞;Hela细胞瞬间转染后0、24、48、72和96h,分为正常的Hela细胞对照组,pcD-NA3.1质粒转染对照组和实验组。分别采用RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测Hela细胞的凋亡;以比色法检测Caspase-3的相对活性。结果:以转染后24、48和72hHela细胞的总RNA为模板,经RT-PCR均可扩增出Apoptin cDNA,正常Hela细胞和空载体转染细胞均为阴性表明Apoptin已在转染细胞中表达;Apoptin基因瞬间转染的Hela细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带,表明有凋亡发生;FCM检测发现,以Apoptin基因转染后48h,在DNA直方上的G1峰前,即出现1个明显的亚2倍体峰(亚G1峰,即凋亡峰),并随着转染时间延长而增强。细胞凋亡率与对照组相比较差异显著(P〈0.05)。Hela细胞经pcDNAA3质粒转染后24h实验组Caspase-3的活性开始升高,72h达高峰,明显高于正常细胞对照组和pcDNA3.1对照组(P〈0.01)。结论:Apoptin基因可通过激活Caspase-3诱导Hela细胞凋亡。

关 键 词:肿瘤特异性凋亡基因  凋亡  基因治疗
文章编号:1007-385X(2007)04-0333-05
收稿时间:2007/5/10 0:00:00
修稿时间:2007-05-102007-07-11

Role of Caspase-3 in Apoptin-induced apoptosis of Hela cells
CAO Jing,ZHAO Hong-li,HUANG Min,GE Quan-zhi and Ning An-hong.Role of Caspase-3 in Apoptin-induced apoptosis of Hela cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2007,14(4):333-337.
Authors:CAO Jing  ZHAO Hong-li  HUANG Min  GE Quan-zhi and Ning An-hong
Affiliation:1. Department of Microbiology, Dalian Medical University,Dalian 116027, China; 2. Laboratory of Molecular Biology, Center of Disease Prevention and Control, PLA Shenyang Military Area Command, Shenyang 110034, China
Abstract:Objective: To explore the role of Caspase-3 in Apoptin gene-induced apoptosis of Hela cells. Methods:Hela cells were transiently transfected with recombinant pcDNAA3 plasmid containing Apoptin gene. This study was divided into normal control group, pcDNA3
Keywords:Caspase-3
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