| 重组人肝再生增强因子的克隆、表达及纯化 |
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| 引用本文： | 盛吉芳,俞海英,李君,周林福,李兰娟.重组人肝再生增强因子的克隆、表达及纯化[J].中华传染病杂志,2005,23(3):157-160. |
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| 作者姓名： | 盛吉芳 俞海英 李君 周林福 李兰娟 |
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| 作者单位： | 310003,杭州,浙江大学医学院附属第一医院 |
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| 基金项目： | 国家863计划（2003AA205150）、国家自然科学基金（30170255）、浙江省“新世纪151人才工程”、浙江省卫生厅医学科研人才基金（2001.QN01,2004B064）、浙江省中医管理局青年人才基金（No：2002C037）、浙江省自然科学基金（Y204156） |
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| 摘 要： | 目的通过构建原核表达系统，在大肠埃希菌中表达重组人肝再生增强因子（hALR）蛋白，为各种急慢性肝损伤及肝衰竭的治疗提供新的治疗方法奠定基础。方法利用正常人肝组织提取总RNA，经一步法逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）获取hALR cDNA全序列，构建原核表达载体hALR—pET28a（＋）转化大肠埃希菌（BL21），诱导表达重组hALR蛋白，以组氨酸为标签进行蛋白纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot鉴定重组蛋白。结果经双酶切和DNA测序证实hALR cDNA正确插入表达载体pET28a（＋），成功表达并纯化得相对分子质量为23000的重组蛋白，低温诱导表达使可溶蛋白明显增加，与预期结果相符。结论成功表达和纯化获重组hALR蛋白。
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| 关 键 词： | 肝细胞生长因子 基因表达 重组蛋白质类 重组人肝再生增强因子 蛋白纯化 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 逆转录聚合酶链反应 原核表达载体 Western hALR |
| 收稿时间： | 2005-01-15 |
| 修稿时间： | 2005年1月15日 |
Cloning, expression and purification of recombinant human augmenter of liver regeneration |
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| Cheng JiFang;Yu HaiYing;Li Jun;Zhou LinFu;Li LanJuan.Cloning, expression and purification of recombinant human augmenter of liver regeneration[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2005,23(3):157-160. |
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| Authors: | Cheng JiFang;Yu HaiYing;Li Jun;Zhou LinFu;Li LanJuan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepalocyte growth factor Gene expression Recombinant proteins purification |
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