| rAAV2载体介导G卯基因转染树突状细胞 |
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| 引用本文： | 周小莹,暨明,刘君彦,谭孟群.rAAV2载体介导G卯基因转染树突状细胞[J].中南大学学报(医学版),2007,32(5):742-746. |
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| 作者姓名： | 周小莹 暨明 刘君彦 谭孟群 |
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| 作者单位： | [1]中南大学基础医学院生理学系血液研究室,湖南长沙410078 [2]上海复旦张江生物公司,上海201203 |
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| 基金项目： | 基金项目：国家863计划项目（2005AA223G10）;高校博士点基金资助项目（20040533031）;湖南省卫生厅科研基金（C2006-001） |
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| 摘 要： | 目的：在诱导人骨髓CD34^＋细胞分化成树突状细胞（dendritic cells，DCs）的基础上，探讨2型重组腺相关病毒（Type 2 recombinant adeno-associated virus，rAAV2）载体介导绿色荧光蛋白（green fluo-rescent protein，GFP）基因转染DCs的条件。方法：采用免疫磁珠法分离纯化人骨髓来源的CD34^＋细胞。在含有IL-4和GM-CSF的培养体系中体外诱导CD34^＋细胞生成DCs，于第5天加入TNF-α诱导DCs成熟，在不同时间用rAAV2载体介导GFP基因转染未成熟和成熟的DCs。通过电子显微镜和流式细胞仪鉴定树突状细胞，荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达。结果：人骨髓CD34^＋细胞经诱导分化后，在光镜及透射电镜下均可观察到DCs的形态特征，流式细胞仪检测到DCs表型；荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞培养第3天、第5天和加入TNF-α后的rAAV2-GFP转染率分别为0．45％，13．54％和0．25％。结论：本实验中所采用的培养体系可成功将人骨髓CD34^＋细胞诱导分化成DCs，rAAV2／GFP转染DCs效率随细胞诱导分化时间的延长而增高，且转染未成熟DCs的效率高于转染成熟DCs。
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| 关 键 词： | 重组腺相关病毒2型 GFP 树突状细胞 基因转导 |
| 文章编号： | 1672-7347（2007）05-0742-05 |
| 修稿时间： | 2006-11-14 |
GFP gene transfection of dendritic cells mediated by recombinated adeno-associated virus |
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| ZHOU Xiao-ying, JI Ming , LIU Jun-yan, TAN Meng-qun.GFP gene transfection of dendritic cells mediated by recombinated adeno-associated virus[J].Journal of Central South University (Medical Sciences)Journal of Central South University (Medical Sciences),2007,32(5):742-746. |
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| Authors: | ZHOU Xiao-ying JI Ming LIU Jun-yan TAN Meng-qun |
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| Affiliation: | 1. Experimental Hematology Laboratory, Department of Physiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078; 2. Shanghai Fudan- Zhangjiang Bio-Pharmaceutical Co. Ltd , Shanghai 201203, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | adeno-associated virus green fluorescent protein dendritic cells gene transfection |
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