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HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化
引用本文:刘梅冬,张华莉,龚环宇,陈广文,王慷慨,鄂顺梅,肖献忠. HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化[J]. 中南大学学报(医学版), 2006, 31(2): 174-177
作者姓名:刘梅冬  张华莉  龚环宇  陈广文  王慷慨  鄂顺梅  肖献忠
作者单位:中南大学,湘雅医学院病理生理学教研室,长沙,410078
基金项目:中国科学院资助项目;中国科学院资助项目
摘    要:目的:建立HSF1^-/-,HSF1^+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入HSF1^-/-,HSF1^+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G418筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测两种细胞株中目的基因的整合,用RT—PCR法鉴定SV40T基因在转染细胞中的表达;用Western blot检测所建细胞株的诱导型热休克蛋白70的表达情况。结果:有3个细胞克隆已扩大培养稳定传代达6个月,经鉴定SV40T抗原已整合到两种细胞中且稳定表达,HSF1^-/-胚胎成纤维细胞热休克蛋白70的诱导表达消失。结论:成功建立永生化HSF1^-/-,HSF1^+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞。

关 键 词:HSF1  基因敲除  胚胎成纤维细胞  永生化  SV40T抗原  
文章编号:1672-7347(2006)02-0174-04
收稿时间:2005-04-29
修稿时间:2005-04-29

LIU Mei-dong,ZHANG Hua-li,GONG Huan-yu,CHEN Guang-wen,WANG Kang-kai,E Shun-mei,XIAO Xian-zhong.
Authors:LIU Mei-dong  ZHANG Hua-li  GONG Huan-yu  CHEN Guang-wen  WANG Kang-kai  E Shun-mei  XIAO Xian-zhong
Affiliation:Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha, China.
Abstract:
Keywords:HSF1
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