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抗华支睾吸虫CAg噬菌体抗体表达与活性鉴定
引用本文:俞慕华,陈代雄,詹希美. 抗华支睾吸虫CAg噬菌体抗体表达与活性鉴定[J]. 中国公共卫生, 2004, 20(11): 1320-1322
作者姓名:俞慕华  陈代雄  詹希美
作者单位:1. 深圳市南山区疾病预防控制中心,518054
2. 广州医学院寄生虫教研室
3. 中山大学中山医学院病原生物学部
基金项目:卫生部 (98 - 1 - 85),广东省高教厅“2 1 1工程”学科建设科研基金
摘    要:目的对从抗华支睾吸虫噬菌体抗体库中筛选到的阳性克隆进行诱导表达和鉴定。方法对阳性克隆株1305、C10和E38用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹试验(Western blot)观察有无Fab抗体条带。然后,用卫氏并殖吸虫(Pw)、肝片吸虫(Fh)、姜片吸虫(Fb)、华支睾吸虫(G)、日本血吸虫(Sj)脱脂全虫粗抗原和华支睾吸虫代谢抗原(C5-Mhg)进行SDS-PAGE,并分别和B05、C10和E38噬菌体抗体进行Western blot,鉴定抗体活性。结果Western blot结果表明,3株阳性克隆的培养上清和细菌冻融上清在约50kD和27kD处均有特异抗体条带出现。B05噬菌体抗体与C5-MAg和C5-Ag在约25kD处出现特异性反应条带,而与其它4种吸虫抗原无反应条带的出现。C10除与C5-MAg和华支睾吸虫全虫抗原(C5-Ag)在约38kD处出现反应条带外,还与Sj-Ag在该处有弱阳性反应;而与其它3种吸虫抗原无反应条带出现。E38与C5-MAg和C5-Ag在约16kD处出现特异性反应条带,而与其它4种吸虫抗原无反应条带出现。结论3株阳性克隆均可表达抗华支睾吸虫循环抗原(CAg)噬菌体抗体,其中B05和E38具有特异结合C5-CAg活性。

关 键 词:华支睾吸虫 循环抗原 噬菌体抗体 Western-blot
文章编号:1001-0580(2004)11-1320-03
修稿时间:2004-03-11

Expression and identification of phage antibodies against clonorchis sinensis CAg
YU Mu-hua,CHEN Dai-xiong,ZHAN Xi-mei.Nanshan District Center for Disease Control and Prevention. Expression and identification of phage antibodies against clonorchis sinensis CAg[J]. Chinese Journal of Public Health, 2004, 20(11): 1320-1322
Authors:YU Mu-hua  CHEN Dai-xiong  ZHAN Xi-mei.Nanshan District Center for Disease Control  Prevention
Abstract:
Keywords:clonorchis sinensis  circulating antigen  phage antibody  Western blot
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